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制备单克隆抗体的生物学技术
单克隆抗体制备的
基本原理与过程?
有什么
意义
答:
这种
技术
即称为单克隆抗体技术。过程 1)免疫脾细胞的制备
制备单克隆抗体的
动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活...
单克隆抗体的制备
过程高中
生物
答:
此类抗体是专一的,或者说是同一种蛋白质,因此是单克隆的。二、杂交瘤
技术制备单克隆抗体的
主要步骤。(1)抗原制备。(2)免疫动物。(3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备。(4)细胞融合。(5)杂交瘤细胞的选择培养。(6)杂交瘤细胞的筛选。(7)杂交瘤细胞的克隆化。(8)单克隆抗体的检定。(9)分泌单克隆...
动物细胞工程
单克隆抗体的制备
答:
制备
后的
单克隆抗体
有着广泛的应用,如作为诊断工具,其特异性和灵敏度远超常规抗体。此外,它们还可用于治疗疾病,例如结合抗癌药物制成“
生物
导弹”,精准打击癌细胞。在生命
科学
研究和临床医疗中,单克隆抗体被用于沉淀反应、凝集实验、放射免疫学检测、细胞分型、免疫学检测、亲和层析等众多领域,为疾病...
1975年Kohler和Milstein的
单克隆抗体技术
在生产和使用抗体方面开创了...
答:
(1)
单克隆抗体的制备技术
首先要利用动物细胞融合将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,然后要利用动物细胞培养技术对融合的细胞进行筛选,筛选出杂交瘤细胞,再进行培养.(2)图中细胞A为经过免疫的B淋巴细胞,该细胞不具有分裂能力,但能分泌特异性抗体.细胞B为骨髓瘤细胞,该细胞能够无限增殖.(3)动物细胞...
单克隆抗体的制备
步骤
答:
4、杂交瘤阳性
克隆
的筛选与克隆化:在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性
单克隆抗体
的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备:单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。
免疫
学技术
知识总结 第二章
答:
一、
单克隆抗体制备的
原理 1个B细胞只能产生1个抗体。方法是细胞工程杂交
技术
和B细胞杂交瘤技术 需要将单克隆B细胞和肿瘤细胞相结合才可以永久产生单抗 Barski等发现细胞额自然融合现象,但是频率很低 冈田等发现灭火的仙台禀赋和聚乙二醇能显著提高细胞融合的效率。 二、
单抗制备的
基本条件 需要培养正常的B细胞以及B...
备
单克隆抗体的
途径
答:
(1)①表示效应B细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的过程,其依据的原理是细胞膜的流动性,骨髓瘤细胞能无限增殖,B细胞能产生单一性抗体;诱导动物细胞融合通常用灭活的病毒;过程②至少需要2次筛选才能得到X细胞,第一次筛选获得杂交瘤细胞,第二次筛选获得能产生
单克隆抗体的
杂交瘤细胞. (2)④...
单克隆抗体制备
中诱导细胞融合的手段有哪些
答:
诱导细胞融合的方法有三种:
生物
方法(病毒)、化学方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(电激和激光)。某些病毒如:仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein),可介导病毒同宿主细胞融合,也可介导细胞与细胞的融合,因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合。化学和物理方法...
什么是
单克隆抗体
?
有何
特点及应用价值?
答:
单克隆抗体的制备
比较复杂,其中涉及多种
生物学技术
,在此简述其过程.用特定的抗原免疫纯系动物(如BALA--C小鼠),多次反复经背部皮下多点注射,每次注射应定量,也要注重接种的时间间隔,可适当的添加弗氏佐剂.经过一段时间的饲养后,选择血清抗体高的接种动物在无菌的情况下处死,取出脾脏剪碎,分离,离心取其悬浮细胞置入...
单克隆抗体的制备技术
路线和关键点
答:
单克隆抗体的
大量生产 大量生产单克隆抗体的方法主要有两种: (1)体外使用旋转培养管大量培养杂交瘤细胞,从一清液中获取单克隆抗体。但此方法产量低,一般培养液内抗体含量为10~60μg/ml,如果大量生产,费用较高。 (2)体内接种杂交瘤细胞,
制备
腹水或血清。 ①实体瘤法:对数生长期的杂交瘤细胞按1~3×107/ml...
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