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基因工程克隆载体
什么是
基因克隆载体
?
答:
作为克隆位点的限制性内切核酸酶的识别序列一般在
克隆载体
上只有一个。为了便于多种类型末端的DNA片段的克隆,克隆载体中往往组装一个含多种限制性内切核酸酶识别序列的多克隆位点(MCS)连杆。(2)克隆载体能携带外源DNA片段(
基因
),容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好,或能停留在细胞质中进行自...
基因克隆载体
需要有哪几个条件?
答:
基因克隆载体
必须具备三个条件,具有能使外源DNA片段插入的克隆位点;能携带外源DNA进入受体细胞,或游离在细胞质中进行自我复制,或整合到染色体DNA上随染色体DNA的复制而复制;必须具有选择标记,以便筛选承载外源DNA的受体细胞。目前原核受体细胞的载体主要有细菌质粒(松弛型)和λ噬菌体两类,真核细胞受体...
什么是
基因工程
的
载体
?
答:
基因工程载体
是能将分离或合成的基因导入细胞的DNA分子,有质粒DNA、病毒DNA、科斯质粒三种主要类型的载体。按人们的意愿去有目的地改造,创建生物遗传性,因此其最基本的工程就是要得到目的基因或核酸序列的
克隆
。分离或改建的基因和核酸序列自身不能繁殖,需要载体携带它们到合适的细胞中复制和表现功能。常...
常见的
载体
类型汇总:质粒载体、噬菌体载体、柯斯载体、病毒载体、人工染...
答:
在
基因工程
的大舞台上,载体如同魔术师的道具,巧妙地承载和传递外源DNA的指令。它们分为两大类:
克隆载体
和表达载体,各自扮演着独特的角色。1. 克隆载体家族 质粒载体,如经典的pBR322,它的抗性基因和复制控制基因使得它成为首选。pUC19以其小巧轻便,便于克隆而闻名,而pUCm-T更是专为带有A末端PCR产...
基因工程
考研题目:试述将一个平末端DNA片段
克隆
到
载体
上EcoRI和Xhol...
答:
答案的两个要点其实就是我们做
载体
构建两个基本侧略。平末端连接和粘性末端连接。第一种就是采用粘性末端连接的策略。通过在你的平末端目的片段两端分别加上含EcoRI和Xhol的酶切位点的接头序列,然后用这两种内切酶分别对目的片段和载体做双酶切,然后回收酶切后的载体和目的片段并连接。第二种就是采用...
基因工程
中常用哪两类
克隆载体
?举例说明理想质粒载体应具备什么条件...
答:
克隆载体
(Cloning Vector):通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖。常见的载体有质粒,噬菌粒,酵母人工染色体。
如何构建
载体
答:
载体
构建目的 ①用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制(称为
克隆
)。理想的运载体是质粒(plasmid),在
基因工程
中,常用人工构建的质粒作为载体。具体过程详解如下图所示:
质粒作为
基因工程载体
的优点
答:
:(1)具有较小的分子量.经验表明,为了避免在DNA的纯化过程中发生链的断裂,
克隆载体
的分子大小最好不要超过10Kb.pBR322质粒这种小分子量的特点,不仅易于自身DNA的纯化,而且可容纳较大的外源DNA片段;(2)具有两种抗菌素抗性
基因
可供作转化子的选择记号,能指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞以及外源...
基因工程
中常用哪两类
克隆载体
?举例说明理想质粒载体应具备什么条件...
答:
质粒
载体
、噬菌体载体 理想质粒载体条件:1.具有复制起始点 2.具有两种以上易被检测的选择性标记 3.在选择标记上具有多种限制酶的单一切点 4.具有尽可能小的相对分子质量 5.应属于松弛复制型 6.应为非传递性质粒 理想值粒载体例子:(一)pBR22质粒载体:1.相对分子质量较小 2.具有一个复制起始点...
基因工程
的
克隆载体
有哪些研究?
答:
基因工程
的发展与
克隆载体
的构建密切相关,至今已构建了大量克隆载体。以构建克隆载体的材料分为质粒载体系统、病毒(噬菌体)载体系统、质粒同病毒(噬菌体)DNA组成的载体系统、质粒同染色体DNA片段组成的基因整合载体系统以及叶绿体DNA或线粒体DNA构建的载体系统。以载体的用途分为通用克隆载体、大片段DNA...
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