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如何测DNA浓度
试述两种
测定DNA浓度
的方法
答:
1、紫外光吸收法:因为组成核酸的碱基
,在260纳米处具有强吸收峰,所以通过测定260纳米的吸收峰,即可对DNA进行定量。但有时会因为所处溶液的pH值不同而导致吸光系数的不同,.因此,一般在中性pH值左右的环境中进行测定;2、溴化乙锭荧光强度法:当DNA含量很低而样品中杂质含量高时,会影响紫外光吸收值...
计算得到
dna
样品
浓度
的依据是什么
答:
依据是OD260值。
计算DNA样品浓度的依据是测量其在紫外光谱下的吸收值,即OD260值
。根据OD260=1时,双链DNA浓度为50μg/ml,单链DNA或RNA浓度为40μg/ml的标准浓度,可以通过测量样品的OD260值,按照公式:样品DNA浓度(μg/ml)=OD260×40μg/ml×稀释倍数,计算出样品的DNA浓度。
DNA浓度怎么测
答:
一般最简单的方法是用比如nanodrop这样的紫外分光法进行检测
,还有用染料法的比如qubit,还有荧光定量的,但是这个是要特定DNA的。
DNA浓度
鉴定纯度鉴定方法有哪些
答:
用紫外分光检测就很简单 将待测DNA溶液作适当稀释
,选用光程为0.5cm的石英比色杯,在紫外分光光度计上测定OD260和OD280的值,按以下公式计算DNA浓度.DNA浓度(ng /µL)=OD260×50×稀释倍数 当OD260/OD280< 1.8,表示蛋白质含量较高 当OD260/OD280> 2.0,表示RNA含量较高 当OD260/OD280...
如何
使用荧光分析法分析
DNA的浓度
?
答:
荧光分析法是一种通过特定DNA染料来测定双链DNA浓度的高效技术。以下是几种常用的荧光染料及其在
DNA浓度测定
中的应用:1. 溴化乙锭:这是一种嵌入DNA分子的染料,其荧光强度与DNA浓度相关,每2.5个碱基对嵌入一分子。302nm的紫外线激发下,荧光比游离染料强约20-25倍。除了用于琼脂糖中
DNA检测
,还可...
如何
根据Maker判断
DNA浓度
答:
如何
根据Maker判断
DNA浓度
一般用nanodrop测,1μl就可以了。如果没有,跑胶可以估测。可以比较条带与marker中分子量比较接近的条带的灰度,再根据marker的量计算出大致的浓度。做连接用不了多少DNA的。根据你说的情况,我觉得你的样品浓度分别大概在30和15左右。一般都是用nanodrop
测定DNA
和RNA的浓度,...
如何
使用简单的实验方法
检测DNA
纯度
答:
DNA/RNA在260nm处有最大的吸收峰,蛋白质在280nm处有最大的吸收峰,盐和小分子则集中在230nm处。因此,可以用260nm波长进行分光
测定DNA浓度
,OD值为1相当于大约50μg/ml双链DNA。如用25px光径,用 H2O稀释DNA/RNA样品n倍并以H2O为空白对照,根据此时读出的OD260值即可计算出样品稀释前的浓度:DN...
测DNA
含量绘标准曲线时,
怎么
算
DNA的浓度
答:
测DNA
含量绘标准曲线时,算
DNA的浓度
的方法:先把标准品的浓度和每个标准品的吸光度用Excel生成标准曲线,同时得到公式。测量每个样本的吸光度。把吸光度代入公式,计算出对应的浓度.如果样本有稀释,还要乘以稀释倍数。DNA及RNA含量测定方法:取5ulDNA样品或4ulRNA样品加水到lml。用lml水做空白。把样品杯...
试述两种
测定DNA 浓度
的方法?
答:
测定
RNA
浓度
按以下步骤进行操作:⑴ 取1μl RNA原液,放在0.5ml EP管中,加入249μl dd H2O,用移液枪反复混匀。 ⑵ 用dd H2O为空白对照,调节A260零点。⑶ 倒掉比色杯中的水,加入稀释并混合均匀的RNA样液,测定A260值。倒掉比色杯中的RNA样液,用dd H2O冲洗比色杯,再调节A280零点。⑷ ...
如何
利用分光光度计
测量dna
样品的
浓度
和纯度?还有其他方法?他们之间...
答:
取1μDNA,用ddH2O水稀释到1ml,以1ml ddH2O为对照,紫外分光光度计
测定
OD260,OD280,OD260/OD280(都在 1.8左右之间,说明 DNA样品纯度较高),concentration。另,基因组DNA1%的琼脂糖凝胶电泳
检测
均呈现完整清晰条带没有拖尾,说明 DNA 样品的完整性好,也可通过DNA marker 推算出
DNA浓度
。
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