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用两种限制酶切割的优点
2不同的
限制酶切割
目的基因和质粒
有什么优点
?
答:
一般会
使用
相同的
两个限制
性核酸内切酶对目的基因和载体进行
切割
,使它们产生相同的末端,可以在T4 dna 连接
酶的
作用下,进行连接反应,构建重组质粒。一般在构建重组质粒的时候都会先用大肠杆菌做克隆,因为大肠杆菌的步骤简单,培养方便,提取质粒方便。望采纳 ...
.不同的
限制酶切割
目的基因和质粒
有什么优点
?为什么一般选用大肠杆菌作 ...
答:
一般会
使用
相同的
两个限制
性核酸内切酶对目的基因和载体进行
切割
,使它们产生相同的末端,可以在T4 dna 连接
酶的
作用下,进行连接反应,构建重组质粒。一般在构建重组质粒的时候都会先用大肠杆菌做克隆,因为大肠杆菌的步骤简单,培养方便,提取质粒方便。望采纳 ...
为什么用
限制酶切割
目的基因时候需要
使用两种
以上不同的限制酶进行切割...
答:
为了防止目的基因和运载体自身环化。为保证目的基因正序插入运载体,防止反向连接
。限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列,并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。
书上说
用两种限制酶
同时处理质检外源DNA其
优点
可以防止质检和含同的...
答:
用两种限制性内切酶处理DNA可以产生不同的粘性末端(互为同尾酶除外)
,所以在进行连接反应时不会出现同一条DNA自己连接的情况。
为什么要
两种酶
才能
切割
基因(两端要不同的
限制酶
),不能是同一种吗...
答:
用不同限制酶切割的目的是:保证目的基因和质粒(运载体)的准确连接,避免无效连接过多
。可以用不同限制酶切割相同序列的原理:虽然一种限制酶只能识别一种特定的氨基酸序列,但两种限制酶识别的序列可以相包含,例:酶A识别GGATCC序列,酶B识别GATC序列,则GGATCC序列就可以被两种限制酶切割。同步双酶切 ...
基因工程中用
限制酶切割
质粒和目的基因用一种限制酶和
两种限制酶
是否都...
答:
不可以,只能用同一种限制酶来切割质粒和目的基因。原因是,用同一种限制酶来切割,可以产生相同的黏性未端,如果
用两种限制酶切割
,产生的黏性未端一般不相同。
书上说
用两种限制酶
同时处理粒,检外源DNA其
优点
可以防止质粒和含同的...
答:
每种
限制性内切酶的酶切
位点是不一样的,因此,不同的酶切位点不能连到一起,相同的才可以。用不同的切,到连接的时候,可以有效防止载体自连,只能让外源DNA片段和载体之间那相同的酶切位点相互连接。
DNA完全
酶切
需要具备哪些条件?
答:
完全酶切:用足够的
限制性内切酶
以充分的时间去处理DNA分子,使DNA中所有可能的靶位点都被切割。部分酶切:
限制酶
处理DNA时因酶量或反应时间不足,以致DNA的靶位点只有一部分被裂解。
两种酶切的
优缺点:完全酶切:长度不均一,是黏性末端,但有可能使目的基因断开,大小不可控。部分酶切:片段长度可控,...
什么
是限制性内切酶?ii型
限制性内切酶的
结构特点及性质
答:
限制性内切酶
一般指限制性核酸内切酶,限制性核酸内切酶是可以识别特定的核苷酸序列,并在每条链中特定部位的
两个
核苷酸之间的磷酸二酯键进行
切割的
一类酶,简称
限制酶
。根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第一型(Type I)、第二型(Type II)及第三型(...
形成重组DNA分子的过程中,必须用同一种
限制酶切割
目地基因和载体_百度...
答:
所以也可用两种不同
限制酶
(双酶切)分别同时切割含目的基因的DNA片段和质粒,可以防止目的基因与质粒自身连接体的发生,克服单
酶切的
缺点,但由于每种限制酶作用的条件不同,一般不能
两种酶
不能同时
使用
,而是用完一种就要更换作用的外界条件,以保证酶的高效性。因此双酶切操作较复杂。
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