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简述分析基因表达的具体方法
研究
基因的表达
有哪些
方法
答:
研究基因的表达主要有以下方法:
一、分子生物学方法 1. 基因克隆与测序
。通过PCR等技术,扩增特定基因片段,再进行测序,可以确定基因序列及结构特征,为后续表达研究打下基础。2.
表达谱分析
。利用基因表达芯片或高通量测序技术,检测不同组织或细胞类型中基因的表达水平,揭示特定基因的表达模式。二、遗传...
请举出五种研究
基因表达
调控
的方法
,并简单说明之。
答:
(2)DNA甲基化分析:DNA上特定CpG序列处的胞嘧啶甲基化修饰对基因表达有抑制作用
。检测DNA的甲基化状态有助于了解该基因的转录活性。(3)
体外转录
:建立一个无细胞体系进行体外转录,可对反应条件进行控制,便于研究顺式调控元件和反式作用因子的功能。(4)核转录分析:在细胞核抽提物中加入放射性核素标记...
基因表达的
检测
方法
有哪些
答:
1、生化反应检测法:主要通过酶反应来检测
;2、
免疫学检测法
:通过目的蛋白(抗原)与其抗体的特异性结合进行检测,具体方法有Western杂交、酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫沉淀法;3、生物学活性的检测。Western杂交是将聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分离抗原(Antigen)固定在固体支持物上(如硝酸纤维素膜...
列举两种研究
基因表达
模式
的方法
并
简述
其原理。
答:
【答案】:(1)荧光原位杂交(FISH):首先对寡核苷酸探针做特殊的修饰和标记
,然后用原位杂交法与靶染色体或DNA上特定的序列结合,再通过与荧光素分子相耦联的单克隆抗体来确定该DNA序列在染色体上的位置。(2)基因定点突变技术通过改变基因特定位点核苷酸序列来改变所编码的氨基酸序列,用于研究某个(些)氨基酸...
基因表达
量
的
研究
方法
答:
(1) 无假阳性。GeneFishing技术鉴别的差异表达基因均可通过Northern Blot分析或RT-PCR证实
!现有的DEG检测方法,例如生物芯片和差异显示技术的主要瓶颈就是假阳性的存在。无假阳性可以使研究者能快速辨别可信的差异表达基因。(2) 无需PAGE(聚丙烯酰胺凝胶),琼脂凝胶法即足够。退火控制引物(ACP)极大地...
列举两种研究
基因表达
模式
的方法
并
简述
其原理
答:
2、芯片杂交法和SAGE法。将各样品
的
总RNA反转录得到的总cDNA进一步合成为双链总cDNA,用适当的酶切处理,得到小片段,然后与芯片杂交,电脑对不同样品间相同基因的杂交信号强度进行叠加处理,自动
分析
出各样品间各
基因表达
水平的表达差异性或变化动态。SAGE (serial analysis of gene expression)是基因表达...
基因分析的方法
答:
如果希望寻找部分新基因,这是一种比较简单有效
的方法
;如果希望得到有关某种细胞的
基因表达
谱,可能比较困难;采用双向电泳技术可能会有所帮助〔8〕。2.基因表达系统
分析
( serial analysis of gene expression, sAGE): sAGE法的建立基于两条理论。首先,一段来自某个转录子确定位置的核苷酸,其长度...
双向电泳高通量
分析
是转录水平检测
基因表达的方法
有哪些
答:
双向电泳高通量分析是转录水平检测基因表达的方法如下。
1、生化反应检测法
,主要通过酶反应来检测。2、
免疫学检测法
,通过目的蛋白抗原与其抗体的特异性结合进行检测,具体方法有Western杂交、酶联免疫吸附法ELISA及免疫沉淀法。3、生物学活性的检测。
基因表达
调控
的方式
有哪些
答:
基因表达
调控
的方式
可在多个层次上进行,包括DNA、染色体水平、转录水平、转录后水平、翻译水平和翻译后水平的调控等。具体内容如下:1、DNA、染色体水平调控 基因丢失、基因修饰、基因重排、基因扩增、染色体结构变化;2、转录水平调控 转录起始、延伸、终止均有影响。原核生物借助于操纵子,真核生物通过顺...
研究
基因表达的方法
视频时间 289:15
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