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高通量基因测序怎么做的
基因
组
高通量测序
原理
答:
基因组高通量测序的原理基于双脱氧测序法,最初由Sanger等人在1977年提出。测序过程涉及从每个质粒模板DNA板两端对称进行测序
,每个板需要有两个384孔循环测序反应板。反应使用Big Dye Terminator chemistry version 3.1和M13或标准引物进行,通过BiomekFX工作站进行混合操作,包括等分模板样本、加入反应液,其...
高通量测序
技术及原理介绍
答:
测序原理:将基因组 DNA 片断化,然后克隆到质粒载体上,再转化大肠杆菌
。对于每个测序反应,挑出单克隆,并纯化质粒 DNA。每个每个循环测序反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)使之扩增,并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)使之终止。由于ddNTP的2’和3’都不含羟基,其在DNA的合成过程...
基因
组
高通量测序的
原理
答:
测序
方案建立在双脱氧测序法(Sanger等,1977)的基础上。为了从每一克隆插入片段两端成对地进行测序,每一个质粒模板
DNA
板应配备两个384孔循环测序反应板。测序反应采用BigDyeTerminatorchemistryversion3.1(AppliedBiosystems)和标准M13或常用正向引物和反向引物。测序反应通过BiomekFX(Beckman)移液操作工作站建...
高通量基因测序
产前筛查
怎么做
答:
高通量基因测序产前筛查主要应用在无创胎儿DNA检测中。
首先从孕妇身体抽取5ml血送到试验室,分离提取胎儿的小片DNA进行测序
,判断胎儿是否患有21-三体。21-三体综合征又称唐氏综合征、先天愚型,对胎儿的人生影响非常大,21-三体综合征患者智商比较低,平均寿命比较短,家庭承受的社会压力很大,所以应尽量...
高通量测序
技术简介
答:
small RNA sequencing),通过分离特定大小的RNA分子进行测序,从而发现新的microRNA分子。在转录组水平上,与 染色质免疫共沉淀 (ChIP)和 甲基化
DNA
免疫共沉淀 (MeDIP)技术相结合,从而检测出与特定转录因子结合的DNA区域和
基因
组上的甲基化位点。参考链接:
高通量测序
_百度百科 (baidu.com)
高通量基因测序
是什么意思
答:
高通量是相对于第一代
测序的
,第一代测序只能一次测1个样品的1段序列,产生的数据量相对来说很小,而
高通量测序
一次能够产生的数据量在几十G上百G,可以一次测很多的样本。在2000年的时候,3700、MegaBace等仪器上的测序也是高通量测序,是相对手工测序或者跑平板胶来说的。不过到2005年以后,高通量...
二代
测序
原理及应用
答:
二代测序又称为
高通量
测序(High-throughput sequencing),是基于PCR和基因芯片发展而来的
DNA测序
技术。关于二代测序的临床应用:二代测序作为一种检测手段,主要应用于基因的生殖变异(遗传性)与体细胞变异(获得性)的检测。对于遗传病,主要的技术方案是靶向区域测序(targeted panel),全外显子测序(...
新一代
测序
原理及意义是什么
怎样
理解
高通量
及操作简单?
答:
测序
时,以待测
DNA
片段为模板,进行互补链的合成,每延伸一个碱基就进行一次激光扫描,读出是哪种碱基(四种碱基事先进行不同标记,在激光下呈现不同颜色),很方便地就完成了测序.
高通量
体现在一次上机能测的样本数,第一代测序仪一次上机仅能测96个样本,第二代测序仪一次上机能测数万个样本.操作简单体现...
高通量DNA测序
和基因组学新型技术目录
答:
在
DNA测序
领域,技术不断革新,推动着生命科学的前沿。第一章,从
超高通量
测序的生物技术价值出发,介绍了多种前沿技术,如毛细管电泳和Sanger测序,高通量毛细管微阵列测序,以及质谱测序等,这些技术在基因分型和多态性分析中发挥了关键作用。固相阵列测序装置展现了超敏感检测器的使用,包括合成测序、单...
什么是
基因
二代
测序
?
答:
第二代测序为
高通量测序
,采用微珠或高密度芯片边合成边测序,代表有454,solexa,solid,高通量,可一次获得数G数据,相对与第三代,都仍然需要扩增的方法放大信号,扩增后再检测。第二代测序技术的核心思想是边合成边测序(Sequencing by Synthesis),即通过捕捉新合成的末端的标记来确定
DNA的
序列,现有...
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