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pcr荧光信号采集
实时
荧光
定量
PCR
的介绍
答:
实时荧光定量
PCR
(Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。·Real-timePCR是在PCR扩增过程中,通过
荧光信号
,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期...
rt
pcr
和实时
荧光
定量pcr区别是什么?
答:
rt
pcr
和实时荧光定量pcr区别就是过程不同,具体如下:RT-
PCR
一般情况下是指反转录PCR。基本操作过程是将所提取的RNA进行反转录,然后将所获得的cDNA作为模板,设计引物进行扩增,是一种检测基因表达的常用方法。实时荧光定量PCR也就是Real-Time PCR,Real-timePCR是在PCR扩增过程中,通过
荧光信号
,对PCR...
跑
荧光
定量没有结束前可以提前在电脑上面看结果吗?
答:
图 1:qPCR 扩增曲线图 一般而言,荧光扩增曲线可以分为三个阶段:荧光背景信号阶段(基线期)、
荧光信号
指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化;在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,
PCR
的终产物量与起始模板量之间没有...
实时
荧光
定量
pcr
中什么可以不需要延伸阶段
答:
SYBR定量
PCR
扩增荧光曲线图 PCR产物熔解曲线图(单一峰图表明PCR扩增产物的单一性)2.TaqMan探针法:探针完整时,报告基团发射的
荧光信号
被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就...
什么是实时
荧光
定量
PCR
?有什么作用?请详细说明。
答:
4、高通量大规模的定量
PCR
检测 5、专一性要求不高的定量PCR检测。Taqman Probe PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的
荧光信号
被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性...
如何作QPCR的标准曲线
答:
作QPCR的标准曲线可以用
PCR
-ELISA法作。具体如下:PCR-ELISA法:利用地高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合;再加入抗地高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,最终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。通过测定...
PCR
仪热盖作用
答:
PCR
仪热盖作用是防止蒸发的水汽在管盖上凝结。反应液中的水份还是会有部分变成蒸汽在管中,只是不会凝结在管盖上(如果没有热盖也不加石蜡油,反应管中的水份会全都凝结在管盖上的)。PCR仪的热盖大致可以分为以下四种:非可调式热盖、可调节式热盖、自适应式热盖和自动式热盖。1、非可调式热...
real-time RT-
PCR
是什么意思
答:
实时荧光定量
PCR
(Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。·Real-timePCR是在PCR扩增过程中,通过
荧光信号
,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期...
片段比较短用染料法
pcr
怎么检测
答:
与其他分子生物学技术兼容:对酶切、连接和PCR反应都没有影响。与常规仪器兼容:可用300-495nm的任何类型的光源激发。适合高通量大规模的定量PCR检测。使用浓度对
荧光PCR
结果的影响:SYBR Green I 的使用浓度是影响实验成功与否的关键因素,如果SYBR Green I的浓度不饱和会使
荧光信号
不能反应产物量的变化...
荧光
定量
pcr
的检测下限是多少
答:
pcr荧光
定量检测下限25拷贝。在另外回的一组管子中,加入已知拷贝数的DNA同时扩增,每个管子中加入的数量是不同的,但是从最小数目到最大数目的这个范围涵盖了样本中DNA拷贝数。PCR反应完成后,把已知拷贝数DNA的量和
PCR荧光
Ct值制成标准曲线,再把待测样本的CT值和该标准曲线比对,就可以得到样本中的...
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