22问答网
所有问题
当前搜索:
使用什么法合成cdna
基因工程
答:
人工接头连接:所谓人工接头是指
用
人工合成的,连接在目的基因两端的含有某些限制酶切点的寡核苷酸片断.5,将重组体导入宿主细胞 6, cDNA文库的鉴定 7,目的cDNA克隆的分离和鉴定 (1)核酸探针杂交法 (2)免疫反应鉴定法 逆转录-聚合酶反应法.该
方法
是mRNA经逆转录
合成cDNA
第一链,不需再合成第二链,而是...
如何证明是否mRNA反转录
cDNA
第一链成功
答:
也可以用随机引物去合成大量不同
的cDNA
。 如果要反转录特定的mRNA,就根据它设计特异性引物反转录,这样理论上只有目的cDNA产生 cDNA是反转录法吗?人工合成包括反转录法 cDNA是互补DNA,它是由RNA转录来的,人工
合成法
包括反转录法和化学合成法 mRNA反转录形成cDNA 大致分为
哪些
步骤 mRNA反转录形成...
利用逆转录酶和mRNA模版
合成cDNA
的主要步骤是
什么
答:
1、以mRNA为模板,以四种脱氧核苷酸作原料,在逆转录酶作用下,
合成
DNA单链 2、以DNA单链为模板,以四种脱氧核苷酸作原料,继续合成DNA另一条链,两条DNA链形成
cDNA
mRNA反转录形成
cDNA的
过程是怎样的
答:
有反转录酶,可以以RNA为模版合成DNA。这过程需要引物,根据mRNA有3‘polyA尾巴的特点,可以
用
oligo-dT作为引物,
合成cDNA
,这样可以自然去除非mRNA的RNA的转录。也可以用随机引物去合成大量不同的cDNA。如果要反转录特定的mRNA,就根据它设计特异性引物反转录,这样理论上只有目的cDNA产生。
cdna
名词解释生物化学
答:
将cDNA重组到载体上
合成的cDNA
与载体DNA进行连接一般有3种
方法
:①
cDNA
文库的原理
答:
经典cDNA文库构建的基本原理:
用
Oligo(dT)作逆转录引物,或者用随机引物,给所
合成的cDNA
加上适当的连接接头,连接到适当的载体中获得cDNA文库。其基本步骤包括:(1)mRNA的提纯获取高质量的mRNA是构建高质量的cDNA文库的关键步骤之一。(2)cDNA第一条链的合成。(3)cDNA第二条链的合成。(4)双...
cDNA
第二条链合成的
方法
除了自导
合成法
和置换合成法外,谢谢
答:
还有引导
合成法
,该法获得的双链
cDNA
能保留完整的5’端序列
mrna反转录成
cdna的
原理
答:
该实验的原理如下:mRNA(信使RNA)反转录成
cDNA
(互补DNA)是一种常用的实验技术,用于将mRNA转录成DNA序列,以便后续的基因分析。这个过程主要依赖于一种特殊的酶,称为反转录酶(reverse transcriptase)。反转录酶能够利用mRNA作为模板,
合成
与其互补的DNA序列,即cDNA。
RT -PCR的
合成cDNA
引物的选择
答:
2. Oligo(dT):是一种对mRNA特异的
方法
。因绝大多数真核细胞mRNA具有3’端Poly(A)尾,此引物与其配对,仅mRNA可被转录。由于Poly(A)RNA仅占总RNA的1-4%,故此种引物
合成的cDNA
比随机六聚体作为引物和得到的cDNA在数量和复杂性方面均要小。3. 特异性引物:最特异的引发方法是
用
含目标RNA的...
cDNA文库
的cDNA
答:
稍微离心反应物之后,42℃放置2分钟;6. 反应完成,趁热加入1 ul Superscipt II—RT,混匀;7. 42℃反应50分钟,然后70℃,15分钟灭活反转录酶.2.
cDNA
第二链的
合成
1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存,待电泳检测。其余的产物合并,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega):20ul 10...
<涓婁竴椤
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜