第1个回答 2022-07-07
科研人员在western blot，COIP等涉及抗体方面的实验时，为了将感兴趣的蛋白以抗原抗体免疫反应的方式捕获出来，需要用到一抗；大家很多时候会纠结选多抗还是单抗，下边就简要为大家介绍一下多抗与单抗的差异。
多克隆抗体：
天然的抗原中含有多种特异性的抗原表位，以该抗原刺激免疫系统，体内 多个 B细胞克隆被激活，产生针对不同表位的抗体群，即 多克隆抗体 。
优点：
a.制备成本低廉且制备速度较快。
b.制备过程比单克隆抗体简单。
c.高亲和性：由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子，多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。
d.可识别多个表位，有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 等实验获得更好的结果。
e.与单克隆抗体相比，对微小抗原变化具有更强的包容性。
f.可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质，还可用于检测非免疫原物种的靶蛋白。
g.检测变性蛋白质的首选。
h.多表位可提升检测的稳定性。
缺点：
a.易产生批次间差异。
b.产生大量非特异性抗体，可能会在某些应用中产生背景信号。
c.由于具有多个表位，检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。
d.不适用于探测抗原的特定结构域，因为抗血清通常会识别多个结构域。
单克隆抗体：
单克隆抗体由单个B细胞亲本克隆产生，因此，只能识别单个抗原的特定的一个表位。单克隆抗体对靶向的抗原表位具有高度特异性，非特异性交叉反应性低，批间变异小。
优点：
a.不易产生批次间差异。
b.制得的杂交瘤细胞为持续且可再生产的单克隆抗体来源，而且所有批次均相同，有助于提升实验过程和实验结果的一致性和标准化水平。
c.切片和细胞染色产生的背景信号更少。特异性地检测一个靶表位，不易与其它蛋白质发生交叉反应。
d.与多克隆抗体相比，单克隆抗体的同质性非常高。在相同的实验条件下，单克隆抗体实验之间的结果重现性非常好。
e.得益于其高特异性，单克隆抗体能够在相关分子的混合物中极为高效地结合抗原。
缺点：
a.技术要求较高。应用技术之前需接受专门培训。需要花费较长时间制备杂交瘤细胞。所以价格较高。
b.特异性过高，以致于无法进行跨物种的检测。
c.与多克隆抗体相比，更易受化学处理造成的抗原表位丢失的影响。
d.仅由一种抗体亚型组成。如需使用二抗进行检测，应针对正确的亚类选择抗体。