第1个回答 2017-07-30
做完RNA-Seq测序之后,往往会用QPCR来验证一下结果。
因为RNA-Seq测序数据得到的结果作为定量参考,参数的改变也会造成结果的不同。所以需要进行qPCR验证,表达水平的结果最终以实时定量PCR为准。
一般需要验证基因的数目:20个左右
在验证时,往往会出现RNA-Seq测序结果和QPCR结果不一致的情况,遇到此类情况,因为这是正常现象(活久见)。原因可以查看我们之前的微信分享的文章(戳这里)。
一个事实,我们看到的很多SCI都有验证实验部分,并且文章中的结果居然都是很好!很多同学心里更加捉急,为嘛我的结果不符合预期,为嘛我的结果这么挫?!
其实呢也许作者验证了多个基因,结果选取了10个效果较好的,其他验证结果不好、与预期结果不符或者自己不能阐述清楚的部分基因则建议不在文章中呈现了。所以通常在文章中阐述了少数的几个,例如10个。