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对于蛋白纯度的测定方法
蛋白质纯度的测定方法
有哪些?
答:
双缩脲法(Biuret法):灵敏度低1~20mg
,中速20~30分钟
紫外吸收法
:较为灵敏50~100mg,快速5~10分钟
Folin-酚试剂法
(Lowry法):灵敏度高 5mg,40~60分钟,操作要严格计时;颜色深浅随不同蛋白质变化 考马斯亮蓝法(Bradford法):灵敏度最高1~5mg,15分钟,常用 分子量测定:SDS-PAGE:还原SDS...
为什么标准
蛋白质
必须用凯氏定氮
法测定纯度
答:
首先,因为蛋白质当中含有氮,而且因为氮的含量与蛋白质的含量几乎呈线形相关,
所以标准蛋白质通常用凯氏定氮法测定纯度
。生物材料的含氮量测定在生物化学研究中具有一定的意义,如蛋白质的含氮量约为16%,测出含氮量则可推知蛋白含量。生物材料总氮量的测定,通常采用微量凯氏定氮法。凯氏定氮法由于...
...之
蛋白质的
含量测定与
纯度的测定
内容及思维导图
答:
双缩脲法
,如同化学中的神秘魔法,尿素加热的产物与硫酸铜在碱性溶液中交织出红紫色的交响曲,揭示了肽键的存在,是定性和定量测定蛋白质的利器,尤其是在540nm的比色台上,它如同一把精确的尺子。 黄色反应,含有酪氨酸和色氨酸的蛋白质在硝酸的催化下,仿佛被赋予了色彩,从白色沉淀的初见,到加热...
为什么标准
蛋白质
必须用凯氏定氮
法测定纯度
答:
首先,因为蛋白质当中含有氮,而且因为氮的含量与蛋白质的含量几乎呈线形相关,
所以标准蛋白质通常用凯氏定氮法测定纯度
。生物材料的含氮量测定在生物化学研究中具有一定的意义,如蛋白质的含氮量约为16%,测出含氮量则可推知蛋白含量。生物材料总氮量的测定,通常采用微量凯氏定氮法。凯氏定氮法由于...
用什么进行
蛋白质纯度的
鉴定
答:
1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的
。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(lmax),...
蛋白质纯度
鉴定
的方法
有哪些?
答:
电泳,蛋白质电泳 现在常用就是 SDS 聚丙乙烯酰胺凝胶电泳 特点 1)灵敏度高 2)
测定
快速、简便 3)干扰物质少 液相色谱 高效液相色谱是完全可以纯化蛋白质并且进行
蛋白质纯度
鉴定的 但建议还是使用蛋白质电泳 最主流 最有效
的方法
鉴定
蛋白质
纯化产品的
纯度
,有哪些常用
方法
答:
常用色谱
法
,通过标准品对照图谱进行,分析包括分子筛(大小)、亲和层析(特异性结合)、离子交换(带电性)、疏水(水溶性);或是沉淀法,包括等电点沉淀、差速离子心沉淀、盐析沉淀、亲和沉淀;透析超滤法;电泳法。这些法说不上常不常用 ,都是根据要分析的
蛋白
性质决定的。
如何用HPLC进行
蛋白质纯度检测
及含量
测定
?或测相对分子量?
答:
含量测定:用
蛋白质
标样配制一系列不同浓度的蛋白质溶液,绘制蛋白质浓度与峰高/峰面积相关的标准曲线,再在相同条件下测位置样品的峰高/峰面积,即可得未知样品的浓度;
纯度测定
:保证待测样品中所有组份均出峰的情况下,用目标蛋白的峰面积/峰高除以所有峰峰面积/峰高的总和即可的目标
蛋白的纯度
。
...used to evaluate purity?也就是衡量
蛋白质纯度的
标准有哪些?谢谢...
答:
c. HPLC 常用于多肽、
蛋白纯度
鉴定。纯的样品在HPLC的洗脱谱上呈现出单一的对称峰。d. 溶解度分析 恒浓度法(原理:纯蛋白在一定溶剂系统中具有恒定的溶解度,而不依赖于存在于溶液中未溶解固体的数量,在严格条件下,以加入的固体蛋白
对
溶解的蛋白做图,将只呈现一个折点,折点以前斜率为1,折...
蛋白质
含量
测定方法
有哪些?
答:
蛋白质含量测定方法如下:一、蛋白质含量测定
1.双缩脲法
双缩脲是有两分子尿素缩合而成的化合物。将尿素加热到180℃,则两分子尿素缩合,放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应生成红紫色络合物,称为双缩脲反应。蛋白质中的肽键与之类似,凡是具两个以上肽键的物质均会也能起双缩脲...
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