22问答网
所有问题
当前搜索:
简述逆转录PCR的原理及主要过程
rt
pcr的原理及
步骤
答:
原理
:RT-PCR 为反转录RCR(reverse transcription PCR)和实时PCR(real timePCR)共同的缩写.
逆转录PCR
,或者称
反转录PCR
(reverse transcription-PCR,RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形.在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增.步骤:(一)预变性...
RT-qPCR 基本
原理
答:
一步法RT-qPCR把逆转录与PCR扩增结合在一起,使逆转录酶与DNA聚合酶在同一管内同样缓冲液条件下完成反应
。一步法RT-qPCR只需要利用序列特异性引物。在两步法RT-qPCR中,逆转录和PCR扩增过程是在两个管中完成,使用不同的优化的缓冲液、反应条件、以及引物设计策略。在设计RT-qPCR实验过程中,决定是否...
实验二 RT-
PCR
扩增GADPH
答:
实验过程分为主动逆转录和PCR扩增两部分。
首先,使用Takara试剂盒逆转录RNA,关键步骤包括配制反应液(含Oligo dT Primer、dNTPs、模板RNA和RNase抑制剂等
),在65℃保温后进行酶反应,再通过95℃终止酶活性。然后,进行PCR扩增,以cDNA为模板,通过精确设定的温度和循环次数,确保GAPDH基因片段的高效扩增。P...
逆转录原理
答:
逆转录PCR (RT-PCR )具有较高的灵敏性、操作简单等优点,常用于基因定量分析、生物学检测等,此外常用逆转录PCR克隆目的基因。 本文
主要
讲述了
逆转录PCR的原理
、重要参数以及操作注意事项。cDNA的合成是RT-PCR 的重要环节。以mRNA为模板,在逆转录酶的催化下,随机引物、oligo(dT)或基因特异性引物的引导...
浅谈RT-PCR、qRT-
PCR原理
答:
1、RT-PCR原理 RT-PCR即逆转录PCR,
是将RNA的反转录(Reverse Transcription,RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术
。可用于检测细胞中基因表达水平。mRNA 3’端具有Poly(A)尾,Oligo(dT)与其配对,仅mRNA可被反转录,Oligo(dT)primer 对mRNA进行反转录。核糖核酸酶H (RNase H)是一种核糖核酸...
pcr
技术的基本
原理和过程
答:
pcr技术的基本
原理和过程
如下:qRT-PCR(定量
逆转录聚合酶链式反应
)是利用逆转录酶将RNA模板转录为cDNA,再使用Taqman探针或SYBRGreen等荧光染料检测cDNA的定量过程。以下是关于qRT-
PCR原理的
更加详细介绍。首先,RNA模板经过逆转录反应转化为cDNA,其中需要引物与逆转录酶配合作用,以产生目标序列所需的反向...
普通PCR、原位PCR、反向
PCR和反转录PCR的
基本
原理和
操作步骤(四)_百度...
答:
逆转录PCR
,或者称
反转录PCR
(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。由一条RNA单链转录为互补 DNA (cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的 DNA聚合酶 (逆转录酶)来完成。随后...
分不清反
转录和反转录PCR
,希望能人帮我解释一下
答:
反转录是以RNA为模板,通过反转录酶,合成DNA
的过程
,是DNA生物合成的一种特殊方式。又称为
逆转录PCR
。其
原理
是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性...
实验2:mRNA表达分析技术
答:
一、 目的:掌握
逆转录
和半定量
PCR的
基本
原理和
操作
过程
。二、原理:1.逆转录的基本原理 提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶
反转录
成cDNA。2.半定量PCR的基本原理 是近年来常用的一种简捷的定量RNA测定方法,通过mRNA反转录成cDNA,再进行...
反转录PCR
操作步骤
答:
PCR
操作的
反转录
步骤分为两个
主要
阶段:总RNA的提取和cDNA第一链的合成,以及随后的PCR反应。首先,从样本中提取总RNA。通常取1-5微克RNA,加入DEPC H2O至11微升,再加入Oligo(dT)12-18进行混合。将混合液加热至70℃10分钟后,迅速冷却至冰浴。接下来,按照配方加入SuperScriptTM Preamplification ...
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜
简述PCR引物设计原则
简述Sanger法测序的基本原理
简述原核生物基因组特征
HPV早期转录的基因产物有何功能
简述ctab法提取dna的原理
荧光原位杂交的原理
简述聚合酶链式反应的原理和过程
逆转录的原理及主要过程
简述RNA逆转录的过程