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蛋白质纯度的概念
如何理解
蛋白质纯度的概念
答:
我个人是做蛋白质结晶的啦,对
蛋白质纯度
要求很高。蛋白质纯度高不仅意味着样品里没有别的种类的蛋白质(DNA什么别的就更不在话下了),也意味着没有目标蛋白的降解产物(例如被蛋白酶切过的)以及没有目标蛋白的错误折叠(以至形成沉淀)和错误的二硫键。如果你跑一个变性条件下的蛋白质电泳的话,...
如何利用SDS-PAGE判定
蛋白质的纯度
和分子量
答:
SDS-PAGE判定蛋白质的纯度:若该蛋白质是单肽链蛋白质,则电泳得到的只有一条蛋白带(两条色带:一条为溴酚蓝,一条为蛋白带)
;若得出多条电泳带,则应该用非SDS-PAGE进行电泳,得出单一蛋白带则为单一蛋白质 SDS-PAGE判定蛋白质的分子量:定义:R=de/do R为迁移率,de为蛋白质电泳迁移距离,do...
生物化学高频考点(十七)之
蛋白质的
含量测定与
纯度的
测定内容及思维导图...
答:
纯度鉴定,是科学家们的精细之作
,物理化学手段如等电聚集、凝胶电泳等,像一幅幅精确的分子地图,揭示蛋白质的单一峰或条带,是纯净度的直观体现。需要注意的是,单个鉴定方法只是纯净度的必要条件,而非充分条件,我们需要结合多种手段,确保结论的准确性。最后,为了帮助您更好地掌握这些知识,我们特别...
为什么标准
蛋白质
必须用凯氏定氮法测定
纯度
答:
首先,
因为蛋白质当中含有氮,而且因为氮的含量与蛋白质的含量几乎呈线形相关
,所以标准蛋白质通常用凯氏定氮法测定纯度。生物材料的含氮量测定在生物化学研究中具有一定的意义,如蛋白质的含氮量约为16%,测出含氮量则可推知蛋白含量。生物材料总氮量的测定,通常采用微量凯氏定氮法。凯氏定氮法由于...
为什么标准
蛋白质
必须用凯氏定氮法测定
纯度
答:
首先,
因为蛋白质当中含有氮,而且因为氮的含量与蛋白质的含量几乎呈线形相关
,所以标准蛋白质通常用凯氏定氮法测定纯度。生物材料的含氮量测定在生物化学研究中具有一定的意义,如蛋白质的含氮量约为16%,测出含氮量则可推知蛋白含量。生物材料总氮量的测定,通常采用微量凯氏定氮法。凯氏定氮法由于...
测定
蛋白质纯度的
方法,蛋白质纯度与一般化学试剂纯度有何不同
答:
蛋白质
?用盐析法提纯,蛋白质溶解度本来就不高加点相应的盐就析出了,然后再过滤,得到的晶体或不容物就是所要的蛋白质。
如何用HPLC进行
蛋白质纯度
检测及含量测定?或测相对分子量?
答:
含量测定:用
蛋白质
标样配制一系列不同浓度的蛋白质溶液,绘制蛋白质浓度与峰高/峰面积相关的标准曲线,再在相同条件下测位置样品的峰高/峰面积,即可得未知样品的浓度;纯度测定:保证待测样品中所有组份均出峰的情况下,用目标蛋白的峰面积/峰高除以所有峰峰面积/峰高的总和即可的目标
蛋白的纯度
。
蛋白质
样品
纯度
排序:PAGE一条带,SDS-PAGE一条带,双向电泳一个点,分子大...
答:
SDS-PAGE:是变性胶,SDS的加入破坏了
蛋白的
空间结构,使得不同蛋白间只有分子量不同的差别,因此电泳后,同一条带的蛋白应该是具有相同/接近的分子量 双向电泳(2D):可以根据蛋白的等电点和分子量进行2维电泳,一个点基本就是一个蛋白 因此,你的样品
纯度
排序:双向电泳一个点>PAGE一条带>SDS-PAGE...
如何证明分离得到的
蛋白质
组分是纯的
答:
检测
蛋白质纯度
一般是用SDS-PAGE 要证明是通过分离去掉杂带得到纯度高的目的蛋白也很容易,把分离前的样品,分离过程中分开的杂蛋白组分,目的蛋白组分都跑在同一张胶上。即可证明分离前有的杂蛋白已经在分离过程中被去除掉了,分离后的组分只有单一高
纯度的
目的蛋白。当SDS-PAGE同一泳道就一条目的蛋白条...
...used to evaluate purity?也就是衡量
蛋白质纯度的
标准有哪些?谢谢...
答:
b. 沉降 纯蛋白在离心场中以单一的速度移动。c. HPLC 常用于多肽、
蛋白纯度
鉴定。纯的样品在HPLC的洗脱谱上呈现出单一的对称峰。d. 溶解度分析 恒浓度法(原理:纯蛋白在一定溶剂系统中具有恒定的溶解度,而不依赖于存在于溶液中未溶解固体的数量,在严格条件下,以加入的固体蛋白对溶解的...
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