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蛋白质纯度的测定
蛋白质纯度的测定
方法有哪些?
答:
双缩脲法(Biuret法):灵敏度低1~20mg,中速20~30分钟 紫外吸收法:较为灵敏50~100mg,快速5~10分钟
Folin-酚试剂法(Lowry法):灵敏度高 5mg,40~60分钟,操作要严格计时;颜色深浅随不同蛋白质变化 考马斯亮蓝法(Bradford法):灵敏度最高1~5mg,15分钟,常用 分子量测定:SDS-PAGE:还原SDS...
...之
蛋白质的
含量测定与
纯度的测定
内容及思维导图
答:
Bradford法,考马斯亮蓝G-250如同魔术师的道具,游离时的红色与蛋白质结合后的蓝色,形成鲜明对比,微量蛋白质
的测定
从未如此便捷。 胶体金检测,它的灵敏度如针尖上的舞蹈,纳克级别的蛋白质世界,它都能轻盈地捕捉。
蛋白质纯度
鉴定 纯度鉴定,是科学家们的精细之作,物理化学手段如等电聚集、凝...
用什么进行
蛋白质纯度的
鉴定
答:
完成一个样品
的测定
,只需要5分钟左右。由于染料与
蛋白质
结合的过程,大约只要2分钟即可完成,其颜色可以在1小时内保持稳定,且在5分钟至20分钟之间,颜色的稳定性最好。因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。(3)干扰物质少。如干扰Lowry法的K 、Na 、Mg2 离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、...
如何用HPLC进行
蛋白质纯度
检测及含量
测定
?或测相对分子量?
答:
纯度测定
:保证待测样品中所有组份均出峰的情况下,
用目标蛋白的峰面积/峰高除以所有峰峰面积/峰高的总和即可的目标蛋白的纯度
。
鉴定
蛋白质
纯化产品的
纯度
,有哪些常用方法
答:
常用色谱法
,通过标准品对照图谱进行,分析包括分子筛(大小)、亲和层析(特异性结合)、离子交换(带电性)、疏水(水溶性);或是沉淀法,包括等电点沉淀、差速离子心沉淀、盐析沉淀、亲和沉淀;透析超滤法;电泳法。这些法说不上常不常用 ,都是根据要分析的蛋白性质决定的。
蛋白质纯度
鉴定的方法有哪些?
答:
电泳,蛋白质电泳 现在常用就是 SDS 聚丙乙烯酰胺凝胶电泳 特点 1)灵敏度高 2)
测定
快速、简便 3)干扰物质少 液相色谱 高效液相色谱是完全可以纯化蛋白质并且进行
蛋白质纯度
鉴定的 但建议还是使用蛋白质电泳 最主流 最有效的方法
为什么标准
蛋白质
必须用凯氏定氮法
测定纯度
答:
首先,因为
蛋白质
当中含有氮,而且因为氮的含量与蛋白质的含量几乎呈线形相关,所以标准蛋白质通常用凯氏定氮法
测定纯度
。生物材料的含氮量测定在生物化学研究中具有一定的意义,如蛋白质的含氮量约为16%,测出含氮量则可推知蛋白含量。生物材料总氮量
的测定
,通常采用微量凯氏定氮法。凯氏定氮法由于...
为什么标准
蛋白质
必须用凯氏定氮法
测定纯度
答:
首先,因为
蛋白质
当中含有氮,而且因为氮的含量与蛋白质的含量几乎呈线形相关,所以标准蛋白质通常用凯氏定氮法
测定纯度
。生物材料的含氮量测定在生物化学研究中具有一定的意义,如蛋白质的含氮量约为16%,测出含氮量则可推知蛋白含量。生物材料总氮量
的测定
,通常采用微量凯氏定氮法。凯氏定氮法由于...
测定蛋白质纯度的
方法,蛋白质纯度与一般化学试剂纯度有何不同
答:
蛋白质
?用盐析法提纯,蛋白质溶解度本来就不高加点相应的盐就析出了,然后再过滤,得到的晶体或不容物就是所要的蛋白质。
如何用HPLC进行
蛋白质纯度
检测及含量
测定
?或测相对分子量?
答:
一定要过滤过的,或者离心的,不能有沉淀。然后放在在高效液相色谱样品价中 设置HPLC的参数,包括流速,温度等等 之后观察独处的数据有几个特异性吸收峰,就可以看出来是否纯,都是什么杂质 根据读出的OD数据,计算
蛋白
含量 根据特征谱带预测是什么蛋白,与标准品或者发表的谱带比较,得出相对分子量 ...
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