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蛋白的检测波长判断纯度
什么试剂盒需要使用340nm和410nm双
波长检测
?
答:
使用340nm和410nm双
波长检测
的试剂盒通常涉及测量
蛋白质的
含量和
纯度
,尤其是含有色氨酸、酪氨酸和二硫键等色团的蛋白质。这种技术通常称为Bradford法,是一种常用的蛋白质定量方法之一。在Bradford法中,双波长检测340nm和410nm的波长用于
检测蛋白
质产生的吸收峰,从而测量蛋白质的含量和纯度。
紫外光吸收法
测定蛋白质
浓度时,为什么要同时测定280nm及260nm的吸光度...
视频时间 11:40
说明常用
蛋白质测定
方法的原理,并对各种方法加以比较
答:
大多数蛋白质在280nm
波长
处有特征的最大吸收,这是由于蛋白质中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,可用于
测定
0.1~0.5mg/mL含量的蛋白质溶液。取9支试管分别标号,前8支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液,1号试管不加标准蛋白溶液,最后一支试管加待
测蛋白质
溶液,而不加标准蛋白溶液,每支试管液体...
紫外吸收法为什么能
测定
核酸的含量和
纯度
?
答:
在一定浓度范围内,蛋白质溶液在最大吸收波长处的吸光度与其浓度成正比
,服从朗伯-比耳定律,因此可作定量分析。该法测定蛋白质的浓度范围为0.1—1.0mg/mL。(2)此种方法测量的准确度差一点的原因:由于不同蛋白质中酪氨酸和色氨酸的含量不同,所处的微环境也不同,所以不同蛋白质溶液在280nm的...
如何使用简单的实验方法
检测
DNA
纯度
答:
RNA(ug/ml)=40×OD260读数×稀释倍数。
DNA/RNA纯品的OD260/OD280为1.8或2.0,故根据OD260/OD280的值可以估计DNA的纯度
。若比值较高说明含有RNA,比值较低说明有残余蛋白质存在。OD230/OD260的比值应在0.4-0.5之间,若比值较高说明有残余的盐存在.本实验室机器显示是OD260\OD230,则比值...
DNA或RNA样品不纯,用紫外分光光度计
测定
其浓度和
纯度
的准确性会受到影响...
答:
但紫外法不能区分DNA和RNA,只能用来鉴定核酸的
纯度
和含量。蛋白质由于含有芳香氨基酸,因此也能吸收紫外光。通常
蛋白质的
吸收高峰在280nm
波长
处,在260nm处的吸收值公为核酸的十分之一或更低,故核酸样品中蛋白质含量较低时对核酸的紫外
测定
影响不大。RNA的260nm与280nm吸收的比值在2.0以上;DNA的...
怎样用双缩脲法
测定蛋白质
?
答:
楼主你好:由于蛋白质分子中含有肽键(一C()_一NH一),与双缩脲结构相似,故也能呈现此反应而生成紫红色配合物,在一定条件下其颜色深浅与蛋白质含量成正比,据此可用吸收光度法来
测定蛋白质
含量,该配合物的最大吸收
波长
为560 nm。双缩脲法灵敏度较低,但操作简单快速,是生物化学领域中测定蛋白质...
a260/230比值低于1.8能用吗
答:
1. A260nm——核酸最高吸收峰的吸收
波长
。2. A280nm——
蛋白
最高吸收峰的吸收波长。3. A230nm——是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长。4. A340nm——是基线校准波长,为
检测
溶液样品的浊度和其他干扰因子。该值应该接近0.0。如果不是,表明溶液中有悬浮物,需要纯化样品。纯样品的A340一般是0。...
为什么
波长
不一样,液相色谱
测定纯度
指不一样
答:
1、吸收特性不同:不同物质在特定波长下有不同的吸收特性。这意味着,对于不同
的波长
,物质对光的吸收程度是不同的。因此,使用不同的波长进行液相色谱分析,会得到不同的结果。2、干扰因素不同:在液相色谱分析中,会受到其他物质的干扰。这些干扰物质会影响到目标物质的峰形或导致误判。如果使用的...
如何根据紫外线分光光度法
检测
的RNAA260和A280结果分析RNA浓度与
纯度
...
答:
A260nm是核酸最高吸收峰的吸收
波长
,最佳测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围,稀释bai或浓缩样品,使之在此范围内;如果吸光度小于0.05,
检查
是否存在操作因素(如移液不准确,样品内有悬浮物等)影响。DNA样品的A260 吸光度值是否>0.1。(请注意,这个值跟仪器无关,核酸的吸光度必需大于0...
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