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计算蛋白条带的纯度
如何利用SDS-PAGE判定
蛋白质的纯度
和分子量
答:
SDS-PAGE判定蛋白质的纯度:若该蛋白质是单肽链蛋白质,则电泳得到的只有一条蛋白带(两条色带:一条为溴酚蓝,一条为蛋白带)
;若得出多条电泳带,则应该用非SDS-PAGE进行电泳,得出单一蛋白带则为单一蛋白质 SDS-PAGE判定蛋白质的分子量:定义:R=de/do R为迁移率,de为蛋白质电泳迁移距离,do...
有那些方法可以用来检测
蛋白质
被纯化后
的纯度
答:
过住,然后跑电泳,如果只有一
条带的
话,叫电泳纯;(最常用的)还有光谱纯,利用光学仪器测的;电子纯,利用最先进的仪器,一般学校没有的;
蛋白质纯度
的测定方法有哪些?
答:
凯氏定氮:灵敏度低,适用于0.1.0mg氮,误差为 ±2%,干扰少,费时8小时 双缩脲法(Biuret法):灵敏度低1~20mg,中速20~30分钟 紫外吸收法:较为灵敏50~100mg,快速5~10分钟 Folin-酚试剂法(Lowry法):灵敏度高 5mg,40~60分钟,操作要严格计时;颜色深浅随不同
蛋白质
变化 考马斯亮蓝法...
生物化学高频考点(十七)之
蛋白质的
含量测定与
纯度
的测定内容及思维导图...
答:
胶体金检测,它的灵敏度如针尖上的舞蹈,纳克级别的蛋白质世界,它都能轻盈地捕捉。
蛋白质纯度
鉴定 纯度鉴定,是科学家们的精细之作,物理化学手段如等电聚集、凝胶电泳等,像一幅幅精确的分子地图,揭示
蛋白质的
单一峰或
条带
,是纯净度的直观体现。需要注意的是,单个鉴定方法只是纯净度的必要条件...
酪
蛋白纯度
怎么
计算
答:
要
计算计算
酪
蛋白纯度
,分别以吸光度为纵坐标,各标准液浓度(mg/ml)或含量(mg)作为横坐标作图的标准曲线,由样品液的吸光度查标准曲线求出含量,再根据样品
蛋白质
浓度,得出酪蛋白纯度。酪蛋白是哺乳动物包括母牛,羊和人奶中的主要蛋白质。酪蛋白是一种大型、坚硬、致密、极困难消化分解的凝乳。 酪蛋白...
如何用高效液相色谱(HPLC)进行
蛋白质的纯度
检测及含量测定?或者测分 ...
答:
含量测定:用
蛋白质
标样配制一系列不同浓度的蛋白质溶液,绘制蛋白质浓度与峰高/峰面积相关的标准曲线,再在相同条件下测位置样品的峰高/峰面积,即可得未知样品的浓度;纯度测定:保证待测样品中所有组份均出峰的情况下,用目标蛋白的峰面积/峰高除以所有峰峰面积/峰高的总和即可的目标
蛋白的纯度
。
蛋白质纯度
鉴定最好的两种方法
答:
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与
蛋白质
结合,使染料的最大吸收峰的位置(lmax),由465nm变为595nm,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。经研究认为,染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合。在595nm下测定的吸光度值A595,与蛋白质浓度成正比。Bradford法的...
如何用HPLC进行
蛋白质纯度
检测及含量测定?或测相对分子量?
答:
就是准备好你的样品,一定要过滤过的,或者离心的,不能有沉淀。然后放在在高效液相色谱样品价中 设置HPLC的参数,包括流速,温度等等 之后观察独处的数据有几个特异性吸收峰,就可以看出来是否纯,都是什么杂质 根据读出的OD数据,
计算蛋白
含量 根据特征谱带预测是什么蛋白,与标准品或者发表的谱带比较...
鉴定
蛋白质
纯化产品
的纯度
,有哪些常用方法
答:
常用色谱法,通过标准品对照图谱进行,分析包括分子筛(大小)、亲和层析(特异性结合)、离子交换(带电性)、疏水(水溶性);或是沉淀法,包括等电点沉淀、差速离子心沉淀、盐析沉淀、亲和沉淀;透析超滤法;电泳法。这些法说不上常不常用 ,都是根据要分析的
蛋白
性质决定的。
我问师兄如何让
蛋白纯度
更高,他只告诉我这点……
答:
用Strep-Tactin®XT 来纯化时,得率及
纯度
都提高;且Twin-Strep-tag 搭配后还能用在Biacore 芯片「11,12」、微量滴定板或ELISA 中来固定
蛋白
,进行后续检测,是一个多用途的亲和标签系统。 参考文献 1.Skerra A & Plückthun A(1988)Science, 240, 1038-1041. 2.Schmidt TGM & Skerra A(1993)Protein Eng....
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