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计算蛋白条带的纯度
表达纯化
蛋白
过程中出现一条
条带
略小的非目的蛋白,且同样带有组氨酸标签...
答:
你是如何知道那条非目的
条带
也带有组氨酸标签的呢?亲和层析和目的条带一起洗下来的吧?可能是组氨酸丰度较高的杂蛋白,也可能目的蛋白部分降解。要想获得较高
纯度的蛋白
仅仅用一步亲和层析很难达到。可能试试再加一步甚至多步层析步骤以期得到高纯度的蛋白。可以选择的层析方法推荐使用反向、离子交换。
PCR过程中目的
条带
不够亮,是什么原因
答:
一方面可能是你的引物设计的不够好,导致扩增效率低;二是引物的退火温度,你可以做个温度梯度PCR摸索下最佳退火温度,这样可以提高引物扩增效率.三是,DNA模板,浓度过低
条带
暗,浓度过高,PCR反应会受到抑制,扩增效率不高,或是你提取的DNA
纯度
不高,含有杂
蛋白
同样是导致扩增效率不高,条带不够亮的原因....
...used to evaluate purity?也就是衡量
蛋白质纯度
的标准有哪些?谢谢...
答:
c. HPLC 常用于多肽、
蛋白纯度
鉴定。纯的样品在HPLC的洗脱谱上呈现出单一的对称峰。d. 溶解度分析 恒浓度法(原理:纯蛋白在一定溶剂系统中具有恒定的溶解度,而不依赖于存在于溶液中未溶解固体的数量,在严格条件下,以加入的固体蛋白对溶解的蛋白做图,将只呈现一个折点,折点以前斜率为1,折...
买
蛋白
标准品时候,有两个参数,一个是蛋白含量,一个是
纯度
,两者有什么区 ...
答:
没区别都是%比。
sds- page有什么用?
答:
SDS-PAGE又叫做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,其作用具体如下:由于SDS PAGE可设法将电泳时
蛋白质
电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度。SDS应用于提纯过程中
纯度
的检测,纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一
条带
,但如果蛋白质是由不同的亚基组成的,它在...
为什么标准
蛋白质
必须用凯氏定氮法测定
纯度
答:
首先,因为蛋白质当中含有氮,而且因为氮的含量与
蛋白质的
含量几乎呈线形相关。所以标准蛋白质通常用凯氏定氮法测定
纯度
。
蛋白质纯度
鉴定最好的两种方法
答:
SDS 聚丙乙烯酰胺凝胶电泳(
算
是相对较好的)考马斯亮兰法双缩脲法(Biuret法)和Folin—酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的
蛋白质
溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有...
western转膜 marker与
蛋白
同时转吗
答:
Marker也是蛋白混合物组成的,所以一起转印。如果你用预染marker做电泳,转完后就可以看到Marker彩色的
条带
都已经转到膜上了。只是由于marker 中的
蛋白纯度
和浓度都很高,所以虽然能够部分指示转印效率,但是不能完全代表特定目标
蛋白的
转印情况。
我问师兄如何让
蛋白纯度
更高,他只告诉我这点……
答:
硬核| 细胞培养笔记如何精读一篇文献献给初学者:如何选择合适的荧光蛋白又被蛋白纯化折磨到哭泣,如果早知道这点就好了 用His-tag 做蛋白纯化时,或多或少有这样的经历:要么
蛋白纯度
低、纯化出来的蛋白失去原有结构,要么功能受到影响、难以从哺乳类细胞表达系统中纯化出目标蛋白。 作为一个孜孜不倦积极进取的人,我觉...
蛋白质
含量测定方法有哪些?
答:
能检测到纳克水平。二、
蛋白质纯度
鉴定 1.蛋白质纯度鉴定通常采用物理化学的方法。例如等电聚集、聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-PAGE、毛细管电泳以及沉降分析等。2.如果制品是纯的,在这些分析的图谱上只呈现一个峰或一个
条带
。3.任何单独一种鉴定只能认为是蛋白质分子均一性的必要条件而不是充分条件。
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