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计算蛋白条带的纯度
...酶的
计算
题。有1克酶制剂,用凯氏定氮法测得
蛋白质
含量为10%,该酶的...
答:
第一问,我们先知道比活力的定义,根据国际酶学委员会规定比活力用每毫克
蛋白
所含的酶活力单位数表示,表示
纯度
,这就可以知道该酶制剂总活力=1/125000*2000u 第二问,若一个酶活力单位数(U)规定为:在最适条件下,10分钟内水解300mmol底物所需的酶量,即1mol酶蛋白10min能水解底物2000*300mmol,那么...
pcr前测DNA浓度合格,跑page没有
条带
但是maker清晰,请问是什么原因呢...
答:
DNA在260nm处有最大吸收峰,而蛋白质核酸的主要污染源在280nm处有最大吸收峰,A260/280适合
纯度
测定。通常A260/280在1.7-2.0之间,DNA可被认为是纯品。浓度测定 紫外分光术的另一用途是测定核酸或
蛋白质的
浓度。双链DNA结果 ug/ml=50*O.D.值*稀释倍数 单链DNA结果 ug/ml=37*O.D.值*...
怎么利用层析法纯化酶如何确定目的
蛋白
?
答:
可以通过测定活力确定目的
蛋白
即可。纯化蛋白最有效的就是亲和层析,是通过目的蛋白与相匹配的固定化配体的进行特异性结合,实现纯化目的。最显著的特点就是,良好表征的标签与其对应的固相偶联的配体的结合,能够对标记蛋白单步操作实现亲和纯化。融合标签的抗体也被广泛用于下游检测和实验,从而无需针对每种...
蛋白质
分离提纯方法
答:
1、盐析法:盐析法的根据是
蛋白质
在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、...
如何检查一种酶的制剂是否达到纯的制剂
答:
我们知道这里指的纯是指酶纯度达到了酶的指标即比活力达到要求,可另一方面比活力达到要求,而
蛋白
中含有污染病毒,核酸,宿主细胞杂蛋白,及分离中带人的有害物质等等,这也是等于没达到纯化,所以在分离时要选择正确的分离方法,在每步分离后
计算
纯倍数,收获率,比活力,最后当产品
的纯度
,活性,安全性,稳定性和...
测定
蛋白质
含量只有凯氏定氮法吗
答:
因此双缩脲法常用于需要快速,但并不需要十分精确的
蛋白质
测定。(二)试剂与器材1. 试剂:(1)标准蛋白质溶液:用标准的结晶牛血清清蛋白(bsa)或标准酪蛋白,配制成10mg/ml的标准蛋白溶液,可用bsa浓度1mg/ml的a280为0.66来校正其
纯度
。如有需要,标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,
计算
出其纯度,再...
双缩脲法测定
蛋白质
含量需注意哪些问题
答:
双缩脲试剂由NaOH溶液(0.1g/mL)和CuSO₄溶液(0.01g/mL)配制而成,配制比例为5:1。但是双缩脲试剂不用现配现用,先加入NaoH营造碱性环境,再加入CuSO₄。双缩脲反应主要涉及肽键,因此受
蛋白质
特异性影响较小。且使用试剂价廉易得,操作简便,可测定的范围为1~10mg蛋白质,适于...
如何确认RNA的质量
答:
1、RNA胶(凝胶成像)检测。例如:原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。在胶上就有三条明显大小不一的
条带
。2、凝胶迁移分析。可以用来研究RNA-蛋白相互作用。基本原理是:结合了
蛋白的
RNA在凝胶中的迁移速率更慢,因而可以区分出结合蛋白与未结合蛋白的RNA条带。3、RNA-seq即转录组测序...
如何准确测定样品中
蛋白质的
含量
答:
因此双缩脲法常用于需要快速,但并不需要十分精确的
蛋白质
测定。 2、试剂与器材 (1)试剂:a、标准蛋白质溶液:用标准的结晶牛血清清蛋白或标准酪蛋白,配制成10mg/ml的标准蛋白溶液,可用bsa浓度1mg/ml的a280为0.66来校正其
纯度
。 如有需要,标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,
计算
出其纯度,再...
什么叫玉米的种性
纯度
答:
另外,如果鉴定的种子本身具有“酶谱不纯”现象,也会影响品种
纯度
鉴定结果的准确性。2.2 种子贮藏蛋白电泳技术 玉米种子贮藏蛋白分子量分布范围较窄,但蛋白质组分之间的电荷差别较大。采用电泳技术可以把带电荷量不同的蛋白质区分开。电泳所出现的蛋白质谱带类型与遗传基因有关,通过分析贮藏
蛋白质的
组成来表达品种间...
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