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计算蛋白条带的纯度
如何用高效液相色谱(HPLC)进行
蛋白质的纯度
检测及含量测定?或者测分 ...
答:
含量测定:用
蛋白质
标样配制一系列不同浓度的蛋白质溶液,绘制蛋白质浓度与峰高/峰面积相关的标准曲线,再在相同条件下测位置样品的峰高/峰面积,即可得未知样品的浓度;纯度测定:保证待测样品中所有组份均出峰的情况下,用目标蛋白的峰面积/峰高除以所有峰峰面积/峰高的总和即可的目标
蛋白的纯度
。
蛋白质纯度
的测定方法有哪些?在线等答案
答:
超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定
蛋白质的
分子量.含量测定方法很多:凯氏定氮:灵敏度低,适用于0.2~ 1.0mg氮,误差为 ±2%,干扰少,费时8小时 双缩脲法(Biuret法):灵敏度低1~20mg,中速20~30分钟 紫外吸收法:较为灵敏50~100mg,快速5~10分钟 Folin-酚试剂法(...
sds- page是什么?
答:
SDS-PAGE又叫做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,其作用具体如下:由于SDS PAGE可设法将电泳时
蛋白质
电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度。SDS应用于提纯过程中
纯度
的检测,纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一
条带
,但如果蛋白质是由不同的亚基组成的,它在...
sds- page是什么?
答:
SDS-PAGE又叫做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,其作用具体如下:由于SDS PAGE可设法将电泳时
蛋白质
电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度。SDS应用于提纯过程中
纯度
的检测,纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一
条带
,但如果蛋白质是由不同的亚基组成的,它在...
如何选择合适的
蛋白
含量测定方法
答:
选择一种
蛋白
测定方法时,需要考虑两个重要因素:缓冲液的化学组成和检测的蛋白量。基于dford方法的Quick Start Bradford和Bio–Rad 蛋白测定灵敏度高,可以兼容糖、巯基乙醇、DTT等。而对于去污剂和NaOH这两种干扰Bradford测定的物质,DC蛋白测定却可以兼容。如果蛋白是在loading buffer中,准备跑1D或2D电泳...
用什么进行
蛋白质纯度
的鉴定
答:
SDS 聚丙乙烯酰胺凝胶电泳 考马斯亮兰法双缩脲法(Biuret法)和Folin—酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的
蛋白质
溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的...
如何选择
蛋白
粉三看
纯度
?
视频时间 00:49
蛋白质纯度
鉴定的方法有哪些?
答:
电泳,蛋白质电泳 现在常用就是 SDS 聚丙乙烯酰胺凝胶电泳 特点 1)灵敏度高 2)测定快速、简便 3)干扰物质少 液相色谱 高效液相色谱是完全可以纯化蛋白质并且进行
蛋白质纯度
鉴定的 但建议还是使用蛋白质电泳 最主流 最有效的方法
怎样
计算
酶
的纯度
?
答:
纯化倍数
计算
公式:(每次比活力)/(第一次比活力)其中:比活力=活力单位数/mg蛋白(氮)=总活力。因此凡用于
蛋白质的
纯化手段均适用于酶的纯化。如盐析法、聚乙二醇沉淀法、有机浴剂分级沉淀法、等电点法、选择性沉淀法、各种柱层析法(吸附层析、离子交换层析、凝胶过滤)、各种电泳法及亲和层析...
我的SDS-PAGE银染,为什么
蛋白条带
之间背景颜色很深
答:
你的样品路径背景颜色有很深的褐色,可能是因为你的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的杂质含量太高了,建议用
纯度
更高的凝胶便可解决上述问题。还有缓冲的pH一般是不用调的,配好即用。
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