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5race和3race有什么区别
RACE
是
什么
技术?
答:
RACE技术主要分为两种类型:5'RACE和3'RACE。
5'RACE用于扩增mRNA的5'端序列,而3'RACE则用于扩增mRNA的3'端序列
。在进行RACE实验时,首先需要从待研究的mRNA中提取出cDNA,然后利用已知的mRNA序列信息设计特定的引物。这些引物通常包括一个与已知序列互补的序列和一个与mRNA的5'或3'端互补的序列。接...
RACE的
原理?
答:
cDNA末端的快速扩增,其中包括3’
RACE和5
’RACE两部分.一.3’
RACE的
原理:在反转录酶的催化下,由mRNA反转录成cDNA,然后再用PCR扩增cDNA,oligo(dT)可作为反转录引物用于cDNA合成.其步骤如下:1.以目的为模板,使用进行反转录反应合成第一条.2.使用上游特异性引物
和3
’端进行反应.3.使用限制酶...
已知部分基因序列,如何获得全长基因?
答:
5’RACE跟3’RACE原理基本一样,但是相对于3’RACE来说难度较大
。 5'-RACE受到诸多因素的影响而常常不能获取全长,因此研究者都着手改进它。这些措施主要是通过逆转录酶、5'接头引物等的改变来实现的,因此出现了包括基于“模板跳转反转录”的SMART RACE技术( switching mechanism at 5′ end of RNA transcript) ...
单边PCR的概念
答:
5’RACE与3’ RACE略有不同。
首先,引物多设计了一个用于逆转录的基因特异引物GSP-RT;其次,在酶促反应中增加了逆转录和加尾步骤
,即先用GSP-RT逆转录 mRNA获得第一链(-)cDNA后, 用脱氧核糖核酸末端转移酶和dATP在cDNA5’ 端加poly(A)尾,再用锚定引物合成第二链(+)cDNA,接下来与3’ RACE过程相同。用接头...
如何设计
3
‘和
5
’
RACE的
引物?
答:
操作会容易一些。gastrodia(站内联系TA)和正常的引物设计一样,关键是Tm要高,提高扩增的特异性,如果你什么基础都没有的话,建议把invitrogen和Clontech的
RACE
kit说明书看一下zcqcau(站内联系TA)我也很是期待:):)小白3521(站内联系TA)我们用的是takara的试剂盒,也还可以 ...
你对应用
RACE
技术克隆cDNA
的5
末端
和3
末端的原理有怎样的了解?_百度...
答:
【答案】:(1)
5
'
RACE
①在反转录酶的作用下,以已知基因片段内部特异性引物启始cDNA第一条链的合成。②RNase混合物降解模板mRNA,纯化cDNA第一条链。③用末端转移酶在cDNA链3'端加入连续的dCTP,形成oligo dC尾巴。④以连有oligo dG的锚定引物和基因片段内部特异的nested引物进行PCR扩增,以期得到目的...
做
Race
时需要3’端和
5
’端Race都做吗?只做一端扩增不出目的片段吗?_百 ...
答:
RACE的
目的是获得全长cDNA。通常,通过某些方法,比如cDNA文库构建然后测序,可以获得cDNA的部分片段,但是cDNA
的5
'末端
和3
‘末端都是未知的,因此就有了这种叫RACE(rapid amplification of cDNA ends)的方法来获得未知的5'和3'末端。实际操作起来要看你已知的cDNA的完整性,假如5'端不完整的话,就做...
请教[选修1]引物问题
答:
1 越靠两头越好,因为靠近两头扩增的两个片段就短,将来测序的时候花钱少,但前提是你得保证引物的TM值和
RACE
配套引物的TM值接近,还有引物的GC含量别太离谱2 可以分开设计,但是
5
‘
race
我们自己设计的引物时下游引物,应和已知序列模版片段反向互补,
3
’race我们设计的是上游引物和已知序列模版片段相同3...
求RT-PCR 流程和注意事项
答:
3.RACE我做过RACE(3RACE是宝生物的Kit;
5RACE
是Gibico),但现在再 进行另一个同源基因
的3RACE
时却怎么也P不出来,这两个基因是由同一对引物扩增出来的,其中一个已经获得了全序列(RACE的方法),而另一个基因 的3UTR却增么也扩不出来,我推测是不是该基因的3UTR太长的缘故,我都快绿了,有无 RT-PCR的常用内标...
race
是
什么
意思
答:
race意思是:种族、赛跑 race解析如下:一、音标 英式读音 [reɪs],美式读音 [reɪs]二、释义 n. 种族, 人种, 赛跑, 比赛, 急流, 人类, 同道, 姜根 vi. 赛跑, 竞赛, 疾走 vt. 与...赛跑, 使疾走, 使猛转 三、词形变化 复数:
races
第
三
人称单数: races 过去式:
raced
...
1
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10
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