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简述碱裂解法提取质粒的原理
为什么
碱裂解法
会有rna污染
答:
碱裂解法
会有rna污染的污染的原因,菌体在NaOH 和SDS 溶液中裂解时,蛋白质与DNA 发生变性,当加入中和液后,
质粒
DNA 分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DN A 不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。
植物基因工程实验技术-
提取质粒
答:
下面步骤来自实验室的试剂盒,不同试剂盒步骤不一样。质粒DNA的
提取方法
主要有
碱裂解法
、煮沸法、酚氯仿裂解法,该试剂盒使用的是碱裂解法(说明书 http://www.biomiga.com.cn/a7/20201220_230008191.pdf )。此方法适用于小量质粒DNA的提取,
提取的质粒
DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。
2020-08-24
质粒
构建
答:
较常用的
质粒提取
方法有三种:
碱裂解法
、煮沸法和去污剂(如Triton和SDS)裂解法。前两种方法比较剧烈,适用于较小的质粒(<15kb)。去污剂裂解法则比较温和,一般用于分离大质粒(>15kb)。 碱裂解法是一种应用最为广泛的制备
质粒的
方法,其
原理
为:当细菌暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中,会使细胞壁破裂,染色体DNA和蛋白...
碱裂解法
小量
提取质粒
,加TE后,为什么不溶解?
答:
问题不会出在TE,TE是水溶液,核酸是非常容易溶解的物质。顺便,小量
质粒提取的
话,纯度很好的质粒沉淀是肉眼不可见的,如果是明显的白色物质,就根本不是质粒而是蛋白质残余。你要确定你提取的有没有问题,你应该做两个实验,1是用分光光度计测A260/A280的比值,你这种情况蛋白质污染应该很多,这个值...
为什么真核生物基因组dna不能用
碱裂解法提取
答:
碱裂解法
只能
提取质粒
,因为质粒是环形双链比较好恢复,而基因组就无法复性了。 基因组DNA只能用表面活性剂法。
质粒提取
为什么加蒸馏水
答:
加蒸馏水是为了促进血细胞破裂,使DNA从细胞核中释放出来。加蒸馏水降低NaCl溶液浓度,使DNA析出。关键要理解实验
原理
。实验原理
提取质粒
DNA的方法有很多种,从提取产量上分可分为微量提取、中量提取、大量提取,从使用仪器上分可分为一般提取和试剂盒
方法提取
,从具体操作方法分可以分为
碱裂解法
、煮沸法...
碱裂解法提取质粒
为什么加溶液ⅱ裂解的时间不能过长
答:
你多放上一会,NaOH就把基因组DNA全弄碎了,跟
质粒
混在一起分不开了
SDS
碱裂解法提取质粒
DNA中加酚氯仿的作用
是什么
?
答:
我也想知道,找了一下:酚是强烈的蛋白质变性剂,能有效使蛋白质变性而除去,氯仿有强烈的脂溶性,去除脂类杂质,本身酚:氯仿:异戊醇=25:24:1的主要作用是
抽提
蛋白质 参考资料:http://zhidao.baidu.com/question/27602711.html?si=1
质粒
DNA提取和细胞基因组DNA
提取的
异同
答:
质粒DNA提取和细胞基因组DNA
提取的
异同 质粒DNA提取一般用沸水浴法和
碱裂解法
,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状
质粒提取
出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解
碱裂解法提取质粒
过程中,EDTA、溶菌酶、NaOH、SDS、乙甲酸、酚/氯仿等...
答:
溶菌酶用不着,
裂解
液1里面的东西就是一些盐类,2里面的东西是沉淀蛋白质的,酒精是沉淀dna的,酚氯仿是抽蛋白的
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