cdna第二条链的合成方法优缺点比较

Question

如题所述

Answer 1

末端转移酶加尾法，用RNaseH、DNA聚合酶与连接酶合成法。
1、末端转移酶加尾法：优点为避免购买昂贵的第二链合成试剂盒，更容易在CDNA两端引入不同的已知序列，不会出现两种引物的交叉污染，而缺点为末端转移酶加尾法无法满足任何需求，最佳的策略是根据研究材料和研究问题的特点，结合自己的实际情况，选择合适的方法，构建出满足研究要求的CDNA文库。
2、用RNaseH、DNA聚合酶与连接酶合成法：优点为基因片段更为连续完整，同时避免连接衔接子，方法更加简单，而缺点为相比用末端转移酶加尾法，合成过程相对复杂。