制备单克隆抗体常用什么作为诱导剂

如题所述

    制备单克隆抗体常用的诱导剂有:化学诱导剂——聚乙二醇(PEG)、生物诱导剂——灭活的病毒(常用灭活的仙台病毒)。

    具体操作方法如下:

     ï¼ˆ1)仙台病毒法融合:

             â‘ ä¸¤ç§ç»†èƒžåœ¨ä¸€èµ·åŸ¹å…»ï¼ŒåŠ å…¥ç—…毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两                    ç»†èƒžç›¸äº’凝聚;

             â‘¡åœ¨37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和                           Mg2+,最适PH为8.0一8.2;

             â‘¢ç»†èƒžè†œè¿žæŽ¥éƒ¨ç©¿é€šï¼Œå‘¨è¾¹è¿žæŽ¥éƒ¨ä¿®å¤ï¼Œæ­¤æ—¶éœ€Ca2+和ATP;

             â‘£èžåˆæˆå·¨å¤§ç»†èƒžï¼Œä»éœ€ATP。

    (2)聚乙二醇(PEG)法:

             èšä¹™äºŒé†‡ï¼ˆPEG)结构为:HOH2C(CH20CH2)nCH2OH,分子量大于200小               于 6000者均可用作细胞融合剂。PEG经高压灭菌后,与温热的Engle氏液混合。             一 般选用分子量为4,000,常用浓度为50%,pH8.0~pH8.2(用10%NaHCO3              è°ƒæ•´ï¼‰ï¼Œåˆ†å­é‡å°çš„PEG,融合效应差,又有毒性,分子量过大,则粘性太大,不            æ˜“操作。

    此外,还有物理方法:离心、振动、电刺激等。

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第1个回答  2015-02-09
制备单克隆抗体常用什么作为诱导剂取决于单克隆抗体的具体制备方法
比如诱导脾细胞和骨髓瘤细胞融合的时候,融合过程中现在用的最为广泛的是化学诱导剂为聚乙二醇
单克隆抗体制备过程如果是运用了动物细胞融合的动物细胞工程技术手段,常用的诱导剂就是灭活的病毒本回答被提问者和网友采纳