提取植物叶片中的水杨酸及测定其含量的方法

如题所述

一般采用柳树,杨树,冬青树皮或猕猴桃果实等来bai提,当然杨柳科的树叶中水杨酸含量也是很高的。

测定含量:

主要仪器:Beckman高效液相色谱仪,岛津荧光检测器,Heidolp旋转蒸发仪。SA标准品,上海五联化工厂生产;甲醇为色谱纯,天津市四友生物医学技术有限公司生产;其余所用试剂均为分析纯;水(二次蒸馏水,自制)。

HPLC检测条件:Cl8柱,7.3mm~20cm;流动相: 甲醇:乙酸缓冲液(pH3.2)=50:50;岛津荧光检测器(激发波长为310nm,发射波长为415nm);流速为1.0mIMmin;进样量为201xL。

提取:

水杨酸可由苯酚与氢氧化钠反应生成苯酚钠,蒸馏脱水后,通二氧化碳进行羧基化反应,制得水杨酸钠盐,再用硫酸酸化,而得粗品。粗品经升华精制得成品。

其制备方法是由苯酚钠盐与二氧化碳羧基化后再经酸化而得。用苯酚及液体烧碱制成苯酚钠盐溶液,真空干燥,然后于100℃下慢慢通入干燥的二氧化碳,当压力达到0.7~0.8MPa时,停止通二氧化碳,升温至140~180℃。

扩展资料:

 水杨酸在某些弱酸性电解液中作为添加剂,也可用作电镀或化学镀的络合剂。化妆品防腐剂。主要用于花露水、痱子水、奎宁头水等水类化妆品。除防腐杀菌作用外,还有祛除汗臭、止痒消肿、止痛消炎等功能。

主要作为医药工业的原料,用于制备阿司匹林、水杨酸钠、水杨酰胺、止痛灵、水杨酸苯酯、血防-67等药物。染料工业用于制备媒染纯黄、直接棕3GN、酸性铬黄等。还用作橡胶硫化延缓剂和消毒防腐剂等。

用作环氧树脂固化的促进剂,也可作为防腐剂。可用来制备水杨酸甲酯、水杨酸乙酯等合成香料。染料工业用作制备直接染料及酸性染料等的原料。还可用作橡胶防焦剂、消毒剂等。

参考资料来源:百度百科-水杨酸

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第1个回答  推荐于2016-11-16
答:
一般采用柳树,杨树,冬青树皮或猕猴桃果实等来提,当然杨柳科的树叶中水杨酸含量也是很高的。

水杨酸(salicylic acid,SA)是一种植物界广泛存在的天然物质,它不仅具有重要的药理效应,而且对植物生长发育过程以及植物抗病性方面有着广泛的调控作用 。SA处理可以延缓多种果实的成熟衰老进程。通过测定果实成熟衰老过程中组织内源SA水平的变化,可以更好了解果实成熟衰老机理,为SA及其衍生物调控果实成熟衰老进程积累基础。但是植物组织中内源SA水平很低,一般在1.0~8.4p~g/g之间_4-一-,果实组织中含量则相对更低,因此如何更有效地提取组织中的SA,并配以更灵敏的检测方法,是研究SA对果实成熟衰老调控的重要内容。
现有的植物组织内源SA提取方法比较复杂,要经过提取、液液分配、蒸干等多个步骤,回收率较低,一般在34.0%~80.7%之间,而血液中SA的提取是通过乙醚或乙醚与石油醚混合物一步萃取法,较现有的植物组织中SA提取法更为简便。

1,提取方法:
取l0.0g叶片充分研磨后,置于50mL的离心管中, 加4.0mL 5% 的三氯乙酸, 加水至20.0mL后再加入30.0mL乙醚,充分摇匀,浸提12h, 于l 000~g下离心5.0min,取出上部乙醚相,水相再经乙醚重复提取2次,合并乙醚相,真空旋转蒸干后,加入1.0mL 50%甲醇50%乙酸缓冲液(pH3.2)的混合液将其溶解,置于Ep—
pendorf管中保存,即为游离态SA样品。水相加l8.5%的HCI至终浓度为3.2%,于80cI=水浴中加热1.0h,冷却后用乙醚提取3次,合并乙醚相,蒸干后加入1.0mL 50% 甲醇+50%乙酸缓冲液(pH3.2)的混合液溶解,置于Eppendorf管中保存,即为结合态SA样品。样品经0,3 Ixm 的微孑L过滤器过滤后,用高效液相色谱(HPLC)进
行检测。

2,测定含量

1-2 主要仪器与试剂
主要仪器:Beckman高效液相色谱仪(带化学工作站),岛津荧光检测器,Heidolp旋转蒸发仪(德国)。
SA标准品,上海五联化工厂生产;甲醇为色谱纯,天津市四友生物医学技术有限公司生产;其余所用试剂均为分析纯;水(二次蒸馏水,自制)。

HPLC检测条件
Cl8柱,7.3mm~20cm;流动相: 甲醇:乙酸缓冲液(pH3.2)=50:50;岛津荧光检测器(激发波长为310nm,发射波长为415nm);流速为1.0mIMmin;进样量为201xL。
1.5 标准曲线的建立
用50%甲醇+50%乙酸缓冲液(pH3.2)的混合液配制浓度为l,0m g/mL的SA溶液,再稀释成0、0.25、0.5、l,0、2,01xg/mL的标准溶液,将不同浓度的标准溶液用HPLC测定,得到标准曲线。

具体参考文献:
题目:《猕猴桃果实中内源水杨酸的提取、测定及其在采后研究中的应用》猕猴桃果实中内源水杨酸的提取、测定及其在采后研究中的应用=Extraction and Determination of Endogenous Salicylic Acid from Kiwifruit and Its Application to Postharvest Research[刊,中]/张玉(浙江大学果实分子生理与生物技术实验室,杭州 310029),陈昆松,张上隆//中国食品学报.—2004,4(3).—6~9
摘要:建立一种更有效的水杨酸(SA)提取、测定方法是了解SA对采后果实成熟衰老生理影响和调控机理的基础。本文采用乙醚一步萃取法提取猕猴桃果实组织中内源SA,用高效液相色谱法(荧光检测器)测定其含量。结果显示,本方法回收率为(96.4±3.0)%,显著高于其它已报道的方法,最低检测限为0.9ng/g·FW。SA的荧光峰面积与浓度在0~2.0μg/mL范围内呈线性关系,达到极显著水平(r=0.9991**),该方法简便易行,样品提取时间比以往报道的方法节省一半,因此可用于成熟果实组织中的内源SA萃取和测定。图4表1参12。

可以到VIP网上详细查询本回答被提问者采纳
第2个回答  2006-03-28
水杨酸(salicylic acid,SA)是一种植物界广泛存在的天然物质,它不仅具有重要的药理效应,而且对植物生长发育过程以及植物抗病性方面有着广泛的调控作用 。SA处理可以延缓多种果实的成熟衰老进程。通过测定果实成熟衰老过程中组织内源SA水平的变化,可以更好了解果实成熟衰老机理,为SA及其衍生物调控果实成熟衰老进程积累基础。但是植物组织中内源SA水平很低,一般在1.0~8.4p~g/g之间_4-一-,果实组织中含量则相对更低,因此如何更有效地提取组织中的SA,并配以更灵敏的检测方法,是研究SA对果实成熟衰老调控的重要内容。
现有的植物组织内源SA提取方法比较复杂,要经过提取、液液分配、蒸干等多个步骤,回收率较低,一般在34.0%~80.7%之间,而血液中SA的提取是通过乙醚或乙醚与石油醚混合物一步萃取法,较现有的植物组织中SA提取法更为简便。

1,提取方法:
取l0.0g叶片充分研磨后,置于50mL的离心管中, 加4.0mL 5% 的三氯乙酸, 加水至20.0mL后再加入30.0mL乙醚,充分摇匀,浸提12h, 于l 000~g下离心5.0min,取出上部乙醚相,水相再经乙醚重复提取2次,合并乙醚相,真空旋转蒸干后,加入1.0mL 50%甲醇50%乙酸缓冲液(pH3.2)的混合液将其溶解,置于Ep—
pendorf管中保存,即为游离态SA样品。水相加l8.5%的HCI至终浓度为3.2%,于80cI=水浴中加热1.0h,冷却后用乙醚提取3次,合并乙醚相,蒸干后加入1.0mL 50% 甲醇+50%乙酸缓冲液(pH3.2)的混合液溶解,置于Eppendorf管中保存,即为结合态SA样品。样品经0,3 Ixm 的微孑L过滤器过滤后,用高效液相色谱(HPLC)进
行检测。