简述pcr基本原理

Question

如题所述

Answer 1

简述pcr基本原理，详细介绍如下：

一、简述：

1、PCR聚合酶链式反应是一种快速，敏感，特异性强的DNA复制技术。其基本原理是通过体外模拟DNA复制过程，通过核酸酶解引物延伸和DNA聚合作用，实现无需纯化DNA单链即可扩增目标DNA段。

2、通过PCR反应的信号产生，在杂交技术及全自动测序仪中得到了广泛应用，为现代实验研究带来了很大启示，也促进了生命科学的发展和技术革新。

二、PCR反应原理：

1、PCR反应原理主要包括3个步骤，分别是变性，引物结合，和延伸。PCR反应的第一步是变性，将双链DNA高温变性为两个单链。。

2、接着第二步是引物结合，通过寻找与单链DNA互补配对即反向互补的寡核苷酸引物与单链DNA互补结合。

3、最后一个步骤是延伸，引物端实现行末延伸并由DNA聚合酶催化经过很多轮延伸及放大，得到大量同一片段，此时单链DNA与引物再度复合，继续进行PCR循环直至上万甚至人数倍的复制。

三、PCR反应中的DNA连锁反应：

1、PCR反应利用DNA聚合酶在引物引导下，不断地模拟DNA复制的过程，即将单链DNA作为模板，逐渐形成新的双链DNA。

2、PCR反应的一个关键因素是寡核苷酸引物的合成，引物长度，，浓度和反向互补性对PCR扩增有重要影响，从而达到特异性扩增。

四、PCR反应的优点和应用：

1、PCR的优点是快速，灵敏，准确，只需极少样品即可进行扩增，适用于微量DNA片段的分析而不必耗费大量的精力去提取DNA，并且还具有根据设计合成任意长度的DNA片段的优势。

2、PCR可以应用于DNA序列检测，基因突变分析，DNA指纹图谱生成，基因克隆等多种方面，并广泛应用于医学，生物学，食品安全等领域。