全国中学生生物学联赛的考试内容主要包括以下几个部分：
首先，理论部分占据了相当大的比重，占总成绩的75%。其中，细胞生物学、生物化学和微生物学是理论试题的重要组成部分，占据了25%的分值，考察学生对细胞结构、生命化学反应和微生物生态的理解。
接下来，植物和动物的解剖、生理、组织以及器官的结构与功能是另一个关键领域，占30%的分数，旨在测试学生对生物体内部构造和生理过程的掌握程度。
动物行为学和生态学则着重考察学生对生物行为规律和环境适应能力的了解，占20%。这要求考生具备一定的生物学与环境科学的结合思维。
遗传学与进化生物学、生物系统学则深入探讨生命的遗传规律和生物种群的演化，占据了25%的分数，对于理解生物多样性以及生命的起源和演变至关重要。
值得注意的是，从2010年起，实验考试的模式有所变化。原有的省分会组织的实验考试被取消，取而代之的是在理论试题中增加实验笔答题，这意味着考生需要在理解理论知识的同时，具备一定的实验操作和分析能力。
高中最重要理科竞赛之一，理论考试以高中生物学为基础，并有一定扩展，扩展的部分可参考高校普通生物学内容。试题难度大于高考，易于全国竞赛试题。理论考分和实验考分按75%，25%分配。