western blot的原理蛋白印氖笛樵硎鞘裁囱有详细的讲解吗

Question

如题所述

Answer 1

western blot的原理，或者说蛋白免疫印迹的原理其实很简单，主要就是抗原和抗体结合的免疫学反应原理
首先采用SDS PAGE电泳，经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离开蛋白质样品。接着转移到固相载体上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
接着就是抗原抗体的免疫学反应，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射显影出蛋白印迹来。其中第一抗体是和作为抗原的蛋白起免疫反应，结合后第二抗体再与此时作为抗原第一抗体起免疫反应。第二抗体上有同位素标记，可以被显色出来。