在每次注射之前要检查确认，有足够剂量的胰岛素，并且把胰岛素笔芯装好，旋转剂量、调节旋钮调至所需注射的单位数。如果所注射的胰岛素为混悬液，应将胰岛素笔上下颠倒十次左右，直到药液成分成为均匀白色混悬液的时候为止，以防止药液浓度不均匀导致血糖控制差。速效胰岛素、短效胰岛素以及甘精胰岛素均是澄清的溶液可以直接注射。
注射部位要进行常规消毒，消毒以后左手捏起注射部位的皮肤，右手握笔，按45度角或者垂直快速进针，右拇指按压注射键缓慢匀速推注射药，注射完毕后针头在皮下停留六秒，再顺着进针的方向快速拔出针头，用棉签按压针眼处三十秒，带上针头帽，注射结束。
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