为什么使用a549细胞做毒性实验
1、培养A549细胞，了解A549细胞的倍增周期，扩增A549细胞；2、收集A549细胞并计数，按照一定的密度如2500细胞/孔，25uL/孔(参考值，需进行优化)进行铺板；3、在细胞板内培养一定时间，如24h等，该时间需要根据具体实验和铺板密度来确定，并且需要优化，至少要等到细胞贴壁之后才可以进行下一步；4、配制ABCD化合物溶液，通常将化合物溶解在DMSO中。由于细胞对DMSO敏感，因此在进行正式实验之前需要对实验体系进行DMSO耐受测试，获得A549在该实验体系中的最大DMSO耐受量。假设A549能够耐受1%的DMSO，那么需要配制100×终浓度的ABCD化合物溶液，并用培养基稀释到终浓度。5、弃掉细胞培养板中的培养液，将配好的化合物溶液转移到细胞培养板中，进行加药处理；6、培养一段时间，例如24h，48h等(该时间需要进行优化)，取出细胞培养板，向其中加入PromegaCaspase3/7Glo检测试剂，震荡10分钟后用酶标仪读板。7、将获得的数值与阴性对照、阳性对照进行比较并转换成作用百分比，即可判断该化合物是否有效。如果化合物配制时是配制的梯度溶液，还能获得活性化合物的IC50.
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