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为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和
如题所述
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推荐答案 2012-08-06
不知道具体的情况是什么,只能有几种猜测:
1.有些DNA MAKER的质量不是很好,略微的偏差是正常的。
2.电泳时质粒的状态对最后的结果有很大的影响,双螺旋闭环的质粒电泳时跑得快,比实际偏小,而提取质粒时裂解过了的质粒会开环,此时电泳结果与实际大小差不多。所以要电泳得到正确的质粒大小,最好单酶切。
3.如果载体酶切的粘末端一致,很有可能造成载体自连,两个载体连在一起,或者插入载体的目的片段非单拷贝,虽然这两种情况发生的概率非常小。
建议:
1.酶切验证。
2.实在不放心可以送出去测个序
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其他回答
第1个回答 2012-08-06
质粒作为转基因的载体,在形成转基因载体之前,都会被DNA剪切酶剪切,使其形成能够接受目的基因的片段,而目的基因都是小于被剪去的片段的,所以原来的质粒会大于目的基因片段和载体的和。
第2个回答 2012-08-06
说得具体一点呢
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为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和
答:
1.有些DNA MAKER的质量不是很好,略微的偏差是正常的。2.电泳时质粒的状态对最后的结果有很大的影响,双螺旋闭环
的质粒
电泳时跑得快,比实际偏小,而提取质粒时裂解过了的质粒会开环,此时电泳结果与实际大小差不多。所以要电泳得到正确的质粒大小,最好单酶切。3.如果
载体
酶切的粘末端一致,很有...
...但提质粒跑电泳,分子量比
目的质粒
大很多,
为什么
答:
可能是两个载体互连了
,你酶切了跑胶分析一下长度就清楚了。原因基本跑不了载体互连、多个片段互连,或者根本没提出来,而是
把细菌基因组给弄出来了
,这样你就要检查一下提质粒的过程,仔细看一下胶上有没有条带什么的。不着急,原因很多,逐个分析。
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