4.2.2.1 单光束分光光度计
其光路示意图如图4.7所示，经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液和样品溶液，以进行吸光度的测定。这种简易型分光光度计结构简单、操作方便、维修容易，适用于常规分析。国产722型、751型、岛津UVmini-1240型等均属于此类分光光度计。
4.2.2.2 双光束分光光度计
其光路示意图如图4.10所示，光源发出的光经单色器分光后，经反射镜(M1)分解为强度相等的两束光，一束通过参比池，另一束通过样品池，光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的透光率，经对数变换将其转换为吸光度，并作为波长的函数记录下来。双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池，因而能自动消除光源强度变化所引起的误差。这类仪器有北分瑞利UV-2200型、北京普析通用UV-1901型、岛津UV-1800型等。
图4.10 单波长双光束分光光度计原理图
M1、M2、M3、M4—反射镜
4.2.2.3 双波长分光光度计
其基本光路示意图如图4.11所示，由同一光源发出的光被分成两束，分别经过两个单色器，得到两束不同波长(λ1和λ2)的单色光，利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池，然后经过光电倍增管和电子控制系统，最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值ΔA(ΔA=Aλ1-Aλ2)。对于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)分析，以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下，利用双波长分光光度法往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计，能获得导数光谱。通过光学系统转换，使双波长分光光度计很方便地转化为单波长工作方式。如果能在λ1和λ2处分别记录吸光度随时间变化的曲线，还能进行化学反应动力学研究。此类光度计有国产WFZ800-s型和岛津UV-1780型等。
图4.11 双波长分光光度计光路示意图