如果PCR获得目的基因后,怎样保证目的基因的黏性末端会和质粒的黏性末端互补从而保证目的基因可以和质粒连接?(有的说是要用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒,那么怎么能够保证这个目的基因和质粒有相同的供这种限制性内切酶识别的位点呢?这点一直没明白)望高人解答,谢谢!
谢谢ï¼è¿æ³è¯·é®å¦æå°éå¶æ§å åé ¶çé ¶åä½ç¹åºåå å¨äºPCRå¼ç©å端çè¯ï¼å°±ç¸å½äºå¨å¼ç©åé¢å¤å äºä¸äºç¢±åºï¼å äºè¿äºç¢±åºä»¥åï¼ç»è¿PCRåï¼è¿äºé ¶åä½ç¹ç碱åºåºåä¹ä¼æç §ç¢±åºäºè¡¥é 对ååä¸æçé 对åå¤å¶ï¼å°±ç¸å½äºç®çåºå çåºå åºåæ¹åäºåï¼å 为å¨å¼ç©åé¢å äºé ¶åä½ç¹çåºåï¼ï¼ææä¹å°±æ¯å©ç¨å äºé ¶åä½ç¹åºåçå¼ç©ï¼ç»è¿PCRåæ©å¢åºæ¥çDNAç段就æé ¶åä½ç¹åºå+ç®çåºå ç段åºåï¼è¿æ ·ä¼å¯¹ç®çåºå æå½±ååï¼
谢谢!还想请问如果将限制性内切酶的酶切位点序列加在了PCR引物前端的话,就相当于在引物前面多加了一些碱基,加了这些碱基以后,经过PCR后,这些酶切位点的碱基序列也会按照碱基互补配对原则不断的配对和复制,就相当于目的基因的基因序列改变了呀(因为在引物前面加了酶切位点的序列),意思也就是利用加了酶切位点序列的引物,经过PCR后扩增出来的DNA片段就有酶切位点序列+目的基因片段序列,这样会对目的基因有影响吗?