如图为单克隆抗体制备流程示意图．（1）单克隆抗体制备技术的基础是______．（2）细胞融合是随机的过程，

Question

如图为单克隆抗体制备流程示意图．（1）单克隆抗体制备技术的基础是______．（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是______．在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的______，以保证生命活动的正常进行．（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是______．（4）若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是______．

Answer 1

（1）单克隆抗体制备技术是动物细胞融合技术的应用之一，其基础是动物细胞培养．
（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）．在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的种类和浓度，关注培养基的渗透压和营养充沛，以保证生命活动的正常进行．
（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）．
（4）若用¹⁵N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，单克隆抗体是分泌蛋白质，首先在核糖体中合成，在内质网上初步加工，之后内质网边缘以“出芽”形式冒出囊泡，囊泡离开内质网，转移到高尔基体上，与高尔基体膜融合，囊泡中的物质也进入到高尔基体中，在高尔基体中进一步加工成成熟的蛋白质，高尔基体膜也突起形成小泡，小泡离开高尔基体，转移到细胞膜上，小泡中物质释放到细胞膜外．因此放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜．
故答案为：
（1）动物细胞培养   
（2）筛选杂交瘤细胞   种类和数量（浓度）
（3）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）
（4）核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜