鲁迅家原有兄弟四人，小的早夭，剩下了哥儿仨。鲁迅居长，老二作人，老三建人。
鲁迅和周作人相距四岁，是兄弟间挨得最近的，再加上周作人既聪明又随和，所以他们两个在一起的时候最多，情分自然比旁人也厚，有点什么趣事，常常合着伙的干，很少相瞒。秋天里，桂花飘香，家里人爱在桂树下歇晌，鲁迅和周作人出人意料地表演起自编的儿童剧，把大人逗得乐不可支。冬天，家中盛水的大缸里结了一层薄冰，鲁迅敲碎后捞了来分给周作人吃，咬得满嘴爆响。当然，他们也有扫兴的时候。有一次，鲁迅从一张“老鼠成亲”的画中得知元宵节晚上是老鼠成亲的日子，于是与弟弟一咬耳朵，睁着眼睛守了一夜，结果啥也没看见。第二天，周作人干什么事都无精打采，但对兄长却毫无责备之意。
名医给鲁迅的父亲诊病，看的药方里有一味“蟋蟀一对”，旁边还注着小字道：“要原配。”百草园中虽蟋蟀众多，但要捉到“原配夫妻”却也不易。为此，鲁迅把周作人找来，事先商定好见了那“虫夫妇”就一人捉一只，好在兄弟间也配合惯了，费了一点周折后，总算捉到了一对，用棉线缚了送进药罐里。然而，奇草怪药还是没有救得父亲的命，不久老人家便溘然长逝了。但兄弟间这次在困境下的倾力合作，却深深地铭在了两人的心中，一直到兄弟绝交以后，他们仍忘不了这童稚时代留下的总角深情。
后来兄弟俩先后去日本留学，作人还娶了一位日本夫人，就是羽太信子。在日本期间以及回国后的几年间，兄弟两人协力从事于翻译、绍介等文化事业，在文学革命中更是并肩作战。当时有很多人误以为鲁迅和周作人是一个人。
1923年7月19日，周作人与鲁迅决交，原因众说纷纭。到了三十年代，很少有人会把鲁迅与周作人看成是一条路上的人了——事实上，兄弟两个被水火不相容的两群作家分别奉为了精神领袖。
中共建政后，周作人写作了《鲁迅的故家》，《鲁迅小说里的人物》等书，是鲁迅研究的重要文献。
鲁迅的三弟周建人曾经担任过中华人民共和国浙江省省长。
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