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酵母菌pcr通用引物
...单菌落做诱饵
引物pcr
有诱饵目的条带,而用
通用引物
做pcr没有条带_百...
答:
我遇到过这样的情况,有可能你用的agar含有微量的营养,因此4缺并不是真正意义上的4缺了,换用bacto agar就可以了 还有可能是组氨酸渗透,代谢补偿途径。另外,按说嘌呤是最严格的限制因素,但是我的
酵母
不加嘌呤勉强还可以活,因为接种上去的培养基里有很微量的各种营养。综上,换那种贵的agar,涂板...
酵母菌
是不是可以直接测序,不用提质粒
答:
如果是送公司的话,可以直接测序,测序引物为M13
通用引物
。但是测序之前需要把挑出来的克隆,扩繁、
PCR
检测后再测序。测序公司再提取质粒-测序。如果是自己测序,酶切应该是检测用,阳性的质粒再测序。总之,一般情况下,测序都是用质粒。酶切或者PCR只是用来检测阳性克隆,酶切更准确。现在PCR产物也可以直...
微生物鉴定——
酵母菌
的培养及鉴定流程
答:
株级鉴定:RAPD技术使用分子分型技术如RAPD,通过
PCR
随机多态性扩增来确认同类
酵母菌
是否属于同一株。挑选合适的
引物
(如OPA⁃02、OPA⁃18等),进行扩增,分析电泳结果,确定菌株的遗传多样性。
pcr
的
通用引物
和特异性引物是什么?
答:
通用引物,
含义为克隆位点两旁的序列匹配,目的是引扩出DNA片段,主要用来测序
。而序列特异性引物指一种测定基因突变的方法。通用引物是一般和载体多克隆位点两旁的序列匹配,或者是与载体里面的一些启动、终止元件匹配。这样不管载体插入什么DNA片段,都可以用通用引物扩出来。通用引物可以用来测序,但是只是“...
如何用
PCR
技术检测
酵母菌
?如何选择
引物
?变性、退火、延伸的温度设置为多...
答:
引物
是自己设计的吧。变性一般不就是94度么?退火温度根据给你合成引物的公司合成引物的说明设置,一般上游和下游引物的退火温度不一样,最好设置一个退火温度的梯度P一下,选择最佳温度。Buffer?这有什么好解释的。
...
pcr
用自己的引物老是没有目的条带。但是
通用引物
有条带p出来,这说...
答:
可能是你设计的引物质量不高,建议做个阳性对照
通用引物
扩的区域包括你的插入片段么?如果包括,看大小是否符合。提的质粒做下酶切反应也能知道是否成功插入。祝实验顺利
菌
液或菌落
PCR
的反应体系怎么配置啊,同普通的PCR体系一样吗?用相同的...
答:
菌
液
PCR
一般20ul体系加1ul 菌落PCR建议先挑单克隆溶于10ul无菌水中,取一半作为模板扩增,另一半可以作为菌种保留,如果PCR鉴定正确,再拿出来接种摇菌。两种方法,在PCR程序上最好预变性时间长点,10min左右,或者先对细菌95度处理10min然后立即放到冰上进行预处理,以保证细菌中的质粒裂解释放。
求助:细菌16srDNA鉴定时
PCR通用引物
答:
。随着
PCR
技术的出现及核酸研究技术的不断完善,16S rRNA基因检测技术已成为病原
菌
检测和。
通用引物
1492r/F27,
pcr
后去测序,因为测序软件的自身原因,测出来开头的序列是杂带不准确,如果需要16sRNA的全长,必须做TA克隆,就需要载体的问题了。如果你要求鉴定菌种只到属,完全可以用通用引物。
菌落
PCR
的具体方法
答:
1、菌落
PCR
混合液(通俗称为
pcr
mix)的制备Taq buffer(10×) 180uldNTP(2.5 mM) 20~25 ulPrimer Forward(
引物
浓度在10Pmol) 5 ulPrimer Reverse(引物浓度在10Pmol) 5 ulddH2O 720 ulTaq(2U/ul) 12~15 ul2、常温下随机挑选平板内的单一菌落,用灭菌的牙签或枪头挑取单一菌落(...
细菌的
PCR
扩增为什么要使用细菌基因的16SrDNA
通用引物
?
答:
保守,在种属水平上不同物种内其16s rRNA具有高度保守性,而在种间他们又具有明显的差异性。因此通过设计
引物
扩增16s rRNA的基因可以特异性的得出该细菌是什么细菌(当然有时候还有对获得的扩增产物进行测序)
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