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细菌16sRDNA 用27F和1492R pcr 怎么会有两条带
如题所述
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推荐答案 2017-07-31
现在鉴定细菌常用的方法就是利用16SrDNA.你只需要区分农杆菌和大肠杆菌,这就太简单了,设计一对能扩16SrDNA的引物(比如27F:5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3' ;1492R:5'-TACCTTGTTACGACTT-3'),抽提两种菌的基因组DNA,...
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1492r
/F27,
pcr
后去测序,因为测序软件的自身原因,测出来开头的序列是杂带不准确,如果需要
16s
RNA的全长,必须做TA克隆,就需要载体的问题了。如果你要求鉴定菌种只到属,完全可以用通用引物。
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细菌16srDNA
鉴定时
PCR
通用引物
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6、
PCR
扩增:(细菌的通用引物为
27F和1492R
)将提取得到的DNA进行PCR扩增,电泳检测扩增得到的
16S rDNA
(如果菌类分明,
条带
清晰,PCR原液可直接送去测序,双向测通,得到测序序列后到NCBI的BLAST页面比对,得出鉴定结果)7、酶切带型分型确定操作单元:将扩增产物用HhaI和HaeIII两种限制性内切酶进行酶切...
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