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cdna第二链的合成
RNA反转录的
cDNA
是单
链的
还是双链的
答:
RNA反转录的cDNA是单链的还是双链的 是单链cDNA,想合成双链cDNA需要另外操作:一、
cDNA第二链的合成
:1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存,待电泳检测。其余的产物合并,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega):20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制)xu...
反转录的
cdna
电泳应该是怎样的
答:
RNA反转录的cDNA是单链的还是双链的 是单链cDNA,想合成双链cDNA需要另外操作:一、
cDNA第二链的合成
:1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存,待电泳检测。其余的产物合并,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega):20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制)xu...
合成cDNA第二
条
链的
U3-R-U5-PBS序列时,PBS序列是怎么合成的,以什么为模...
答:
合成cDNA
的第二条链肯定是设计引物后以
cDNA第
一链为模板进行扩增啊.cDNA第一链是通过RNA逆转录而来.所以实验顺序是:RNA提取——第一链cDNA合成——
第二链cDNA合成
.
求教
cDNA
制备的一般方法
答:
根据许多可能的序列,合成出6-10个核苷酸长的寡核苷酸短片段(混合物),作为合成第一链cDNA的引物.在应用这种混合引物的情况下,cDNA的合成可以从mRNA模板的许多位点同时发生,而不仅仅从3'-末端的oligo(dT)引物一处开始.三、
cDNA第二链的合成
1、自身引导合成法:单链cDNA的3'端能够形成发夹状的结构作为...
mRNA反转录中使用olig(t)18做引物所得到的是单
链cDNA
吗?如果是的话如何...
答:
2). 双链 cDNA
的合成
合成 cDNA 第二条链有两种方法。一种方法是利用 cDNA 第一
链的
3' 末端常常出现发夹环的特征,这种发夹结构是反转录酶在第一链末端“返折”并且进行复制第一链的结果,它为合成
cDNA 第二链
提供了有用的引物。用这种方法合成的双链 cDNA 在一端有一个发夹环,可以用单...
构建全长
cDNA
文库哪个试剂盒比较好
答:
详细的技术原理与技术优势请参阅“SMART
cDNA合成
技术简介”.图1.中列出了“SMART文库构建试剂”与“常规文库构建”的比较.技术路线:Clontech推出的两个文库构建试剂盒操作流程都非常的简便、流畅.首先通过SMART技术得到全长的双
链cDNA
,再通过限制酶Sfi酶切后,可直接连接到文库载体中.操作流程如图
2
所示....
2月23号凌晨1点的火车从曲靖出发到上海是几号
答:
2018年2月23日凌晨一点多,曲靖到上海南站的K740次列车,正常情况下是24号的14:33分到达上海南站
基因文库构建的过程、原理及方法
答:
在获得高质量的 mRNA 后,用反转录酶 Oligo(dT) 引导下合成 cDNA 第1链,
cDNA 第2链的合成
(用 RNA 酶 H 和大肠杆菌 DNA 聚合酶 I,同时包括使用 T4 噬菌体多核苷酸酶和大肠杆菌 DNA 连接酶进行的修复反应),合成接头的加入、将双链 DNA 克隆到载体中去、分析 cDNA 插入片断,扩增 cDNA 文库、对建立的 ...
微生物基因建库怎么做
答:
在获得高质量的 mRNA 后,用反转录酶 Oligo(dT) 引导下合成 cDNA 第1链,
cDNA 第2链的合成
(用 RNA 酶 H 和大肠杆菌 DNA 聚合酶 I,同时包括使用 T4 噬菌体多核苷酸酶和大肠杆菌 DNA 连接酶进行的修复反应),合成接头的加入、将双链 DNA 克隆到载体中去、分析 cDNA 插入片断,扩增 cDNA 文库、对建立的 ...
...建立基因组文库的方法 建立基因组文库的其他方法 建立
cDNA
文库...
答:
建立
cDNA
文库的基本步骤 (1)隔离总RNA和净化mRNA (2)合成的双链互补脱氧核糖核酸适合插入一个克隆载体(3)克隆cDNA合适的向量(4)转移到合适的宿主细胞的重组载体(5)筛查阳性克隆cDNA克隆的策略(1)自身引导的
第二链合成
+同聚物加尾(2)cDNA克隆方法的改进。尾随第一链寡核苷酸(DC)允许使用寡核苷酸引物( DG)将要...
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